Создание биопрепарата на основе выделенных и изученных бактериофагов Enterococcus faecalis тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Ковалева, Елена Николаевна

• Ковалева, Елена Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ковалева, Елена Николаевна

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.стр.

ВВЕДЕНИЕ. стр.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. 1. Характеристика бактерий рода ЕМегососсиБ.стр.

1. 2. Этиологическое значение энтерококков в патологии человека и животных.стр.

1.3. Факторы вирулентности энтерококков.стр.

1. 4. Лабораторная идентификация энтерококков.стр.

1.5. Бактериофаги: вирусы бактерий.стр.

1. 6. Применение бактериофагов в диагностической практике.стр.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы

2. 1. 1. Материалы.стр.

2. 1.2. Методы.стр.

2. 2. Результаты исследований и их обсуэвдение

2. 2. 1. Выделение и идентификация бактерий рода ЕЫегососст.стр.

2. 2. 2. Выделение бактериофагов ЕЫегососст.стр.

2. 2. 3. Характеристика биологических свойств выделенных бактериофагов.стр.

2. 2. 4. Разработка технологических параметров изготовления и контроля индикаторных энтерококковых бактериофагов.стр.

2. 2. 5. Разработка параметров ускоренной идентификации бактерий вида

Е./аесаНз с помощью бактериофагов.стр.

2. 2. 6. Разработка оптимальных условий постановки РНФ.стр.

2. 2. 7. Использование РНФ для индикации бактерий вида Е./аесаШ в объектах внешней среды

2.2.1. 1. Исследование с помощью РНФ воды, контаминированной бактериями вида Е./аесаШ.стр.

2.2.1.2. Исследование с помощью РНФ комбикорма, контаминированного бактериями вида E.faecalis.стр.

2. 2.1. 3. Исследование с помощью РНФ мяса, контаминированного бактериями вида E.faecalis.стр.

2. 2. 7. 4. Исследование с помощью РНФ патологического материала, контаминированного бактериями вида E.faecalis.стр.

2.2.1. 5. Исследование маститного молока с помощью РНФ на наличие бактерий вида E.faecalis.стр.

2. 2. 8. Изучение эффективности сконструированного биопрепарата энтерококковых бактериофагов.стр.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание биопрепарата на основе выделенных и изученных бактериофагов Enterococcus faecalis»

Актуальность темы

Энтерококки входят в состав нормальной микрофлоры ротовой полости, кишечника и мочеполовой системы животных и человека, поэтому их обнаружение в объектах внешней среды свидетельствует о биологической контаминации изучаемого объекта [9, 21, 42].

Кроме того, среди этих микроорганизмов встречаются патогенные варианты, способные вызывать поражения мочеполовой системы, бактериальные эндокардиты и бактериемии у людей. Бактериемии могут развиваться как следствие поражений мочевой системы или внутрибрюшинных абсцессов; в 40 % случаев источник проникновения бактерий в кровоток остается неизвестным. Гемолизирующие энтерококки также способны вызывать пищевые отравления и дисбактериозы кишечника [63, 65, 91].

У животных энтерококки вызывают гастроэнтериты, пневмонии, маститы, эндокардиты, менингиты, септоцемию и другие заболевания [26, 29, 51, 68]. Как и свойственно всем условно-патогенным микроорганизмам, их отрицательное воздействие проявляется у особей со снижением общей резистентности.

Энтерококки в настоящее время являются одними из самых часто встречающихся возбудителей нозокомиальных инфекций. Тем не менее, наибольшую опасность вызывает не столько широкая распространенность этих микроорганизмов, сколько их устойчивость к большому спектру антибактериальных препаратов [66, 86, 101, 103, 127].

Все вышесказанное обуславливает актуальность своевременной индикации и идентификации изучаемых микроорганизмов. При использовании бактериологических методов нередко возникает ряд трудностей, связанных с тем, что основой идентификации бактерий являются биохимические (ферментативные) свойства, изучение которых занимает длительное время. Хотя современные методы лабораторной диагностики [20, 80, 82] и являются высокоспецифичными и чувствительными, сложность методик, требования к квалификации персонала, высокая стоимость оборудования и реактивов для постановки этих реакций, делает их недоступными для многих бактериологических лабораторий на данный момент.

Таким образом возникает необходимость изыскания специфичных и менее трудоемких методов исследования. Благодаря специфичности действия бактериофаги используются для определения видовой принадлежности возбудителя, индикации бактерий в объектах внешней среды, диагностики инфекционных заболеваний.

Цель исследования

Разработка технологии изготовления и применения биопрепарата энтерококковых бактериофагов для идентификации и индикации бактерий вида Егйегососст/аесаШ в объектах внешней среды.

Задачи исследования

1. Выделить бактериофаги, активные в отношении бактерий вида Е./аесаШ.

2. Изучить основные биологические свойства выделенных изолятов бактериофагов: морфологию негативных колоний, морфологию фаговых корпускул, литическую активность, диапазон литической активности, специфичность действия, температурную устойчивость, чувствительность к воздействию хлороформа.

3. Отобрать штаммы фагов с заданными биологическим свойствами — высокой литической активностью (титр), широким диапазоном литического действия, выраженной видовой специфичностью, более высоким, чем у бактерий порогом инактивации - для конструирования биопрепарата.

4. Разработать оптимальные параметры идентификации энтерококков с помощью выделенных бактериофагов.

5. Разработать параметры ускоренной индикации бактерий вида Е./аесаШ в объектах внешней среды с помощью реакции нарастания титра фага.

6. Разработать технологические параметры изготовления и контроля биопрепарата энтерококковых бактериофагов.

Научная новизна

- Впервые выделены бактериофаги, активные в отношении штаммов бактерий вида Е./аесаШ, патогенных для животных.

- Изучены основные биологические свойства новых изолятов фагов.

- Разработаны параметры идентификации и индикации бактерий вида Е./аесаШ в объектах внешней среды с помощью бактериофагов.

- Впервые определена технология изготовления биопрепарата бактериофагов бактерий вида Е./аесаШ.

- Доказана эффективность использования биопрепарата для индикации и идентификации бактерий вида Е./аесаШ в условиях производства.

Практическая значимость

Выделенные бактериофаги депонированы во Всероссийском государственном центре качества и стандартизации лекарственных препаратов для животных и кормов (№ 801/15 и № 802/15 от 24 апреля 2009 года), признаны перспективными и рекомендованы для изготовления диагностических и лечебно-профилактических препаратов.

Разработана «Инструкция по изготовлению и контролю серии бактериофагов Е./аесаШ ЕБ — 4 УГСХА и ЕБ — 5 УГСХА», предложены «Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий вида Е./аесаШ из патологического материала, пищевых продуктов, кормов и объектов внешней среды с применением диагностических бактериофагов ЕБ - 4 УГСХА, ЕР - 5 УГСХА» и «Методические рекомендации по ускоренной индикации методом реакции нарастания титра фага бактерий вида Е./аесаШ в патологическом материале, пищевых продуктах, кормах и объектах внешней среды», одобренные Научно-техническим советом Ульяновской ГСХА и утвержденные ректором академии (16 июня 2009 года).

Материалы диссертационных исследований используются при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий по биотехнологии, вирусологии, микробиологии для студентов факультета ветеринарной медицины Ульяновской ГСХА, а также при выполнении тем научно-исследовательских работ.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Разработанная схема выделения энтерококковых бактериофагов позволяет обнаружить и изолировать фаги Е./аесаШ из объектов внешней среды.

2. Изученные биологические свойства бактериофагов Е./аесаШ дают возможность применять отобранные изоляты с диагностической целью.

3. Разработанная схема фагоидентификации бактерий вида Е./аесаШ с применением бактериофагов ЕР - 4 УГСХА и ЕР - 5 УГСХА ускоряет определение видовой принадлежности энтерококков.

4. Разработанные технологические параметры РНФ с использованием фагов ЕР - 4 УГСХА и ЕР - 5 УГСХА значительно сокращают сроки обнаружения гомологичных бактерий в исследуемых объектах.

5. Разработанные технологические параметры изготовления бактериофагов позволили получить фаговый биопрепарат с высокой литической активностью, широким диапазоном действия, строгой видовой специфичностью.

Апробация работы

Материалы работы доложены на Всероссийской научно-практической конференции «Аграрная наука и образование в реализации национального проекта «Развитие АПК» (Ульяновск, 2006); Международных научно-практических конференциях: «Молодежь и наука XXI века» (Ульяновск, 2006), «Роль молодых ученых в реализации национального проекта «Развитие АПК»

Москва, 2007), «Ломоносов-2008» (Москва, 2008), «Актуальные вопросы аграрной науки и образования» (Ульяновск, 2008), «Современное состояние и перспективы исследований по инфекционной и протозойной патологии животных, рыб и пчел» (Москва, 2008), «Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных» (Покров, 2008); Международном конгрессе МАКМАХ / ЕБСМГО по антимикробной терапии (Москва, 2009); Молодежном инновационном форуме Приволжского федерального округа (Ульяновск, 2009); Всероссийской выставке научно-технического творчества молодежи (Москва, 2009).

Результаты изучения биологических свойств бактериофагов ЕР - 4 УГСХА, ЕР - 5 УГСХА и индикации бактерий вида Е./аесаШ в объектах внешней среды методом РНФ подтверждены актами комиссионных испытаний в Ульяновской ГСХА (14 - 16 апреля 2009 года), во Всероссийском государственном центре качества и стандартизации лекарственных препаратов для животных и кормов (22 - 25 апреля 2009 года); актами производственных испытаний на базе бактериологического отдела ОГУ «Ульяновская областная ветеринарная лаборатория» (18-22 мая 2009 года).

Работа выполнена на кафедре микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия».

Публикации

По теме диссертации опубликовано 9 работ, из них 2 — в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Структура и объем диссертации

Диссертация включает следующие разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований и их обсуждение, заключение, выводы, практические предложения и список использованных литературных источников (145 всего, в том числе 65 зарубежных авторов). Работа изложена на 154 страницах текста, иллюстрирована 37 таблицами, 16 рисунками и дополнена приложениями.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Ковалева, Елена Николаевна

Результаты исследований

При исследовании маститного молока бактериологическим методом бактерии вида E.faecalis были выделены из двух проб. Время исследования составило около 120 часов.

При исследовании материала методом реакции нарастания титра фага с использованием специфических энтерококковых бактериофагов бактерии вида Е./аесаШ были обнаружены в пяти пробах. Время исследования составило 28 часов. Результаты представлены в таблице 36.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ковалева, Елена Николаевна, 2009 год

1. Аврех, В.В. О применении бактериофагов в диагностике сальмонеллезов / В.В. Аврех // ЖМЭИ. 1954. - № 7. - С. 93 - 96.

2. Адаме, М. Бактериофаги / М. Адаме. М.: Медгиз, 1961. - 521 с.

3. Архангельский, И.И. Фаготипирование патогенных стафилококков, выделенных из молока коров / И.И. Архангельский, Б.А. Степанов // Ветеринария. — 1996. — № 3. С. 27.

4. Ашмарин, И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев. Л., 1962.

5. Бактериофаги малоизученных энтеробактерий и перспективы их применения в ветеринарии / С.Н. Золотухин и др. // Ветеринарная патология. 2006. - № 3. - С. 80 - 85.

6. Бейли, Н. Математика в биологии и медицине / Н. Бейли. — М.: Мир, 1970.-326 с.

7. Бухарин, О.В. Механизмы выживания энтерококков в организме хозяина / О.В. Бухарин // ЖМЭИ. 2002. - № 3. - С. 100 - 106.

8. Выделение и селекция клонов бактериофагов патогенных энтеробактерий / С.Н. Золотухин и др. // Профилактика, диагностика и лечение инфекционных болезней, общих для людей и животных: материалы

9. Международной конференции, 21—23 июня, 2006. Ульяновск, 2006. — С. 227-231.

10. Габрилович, И.М. Биологические свойства бактериофагов Serratia marcences / И.М. Габрилович // ЖМЭИ. 1992. - № 6. - С. 10 - 12.

11. Габрилович, И.М. Сравнительное изучение бактериофагов Morganella и Providencia / И.М. Габрилович // ЖМЭИ. 1998. - № 5. - С. 20 - 22.

12. Ганюшкин, В.Я. Бактериофаги Salmonella choleraesuis, сравнительная характеристика и практическое применение / В.Я. Ганюшкин // Автореф. дис. . д-ра ветеринар, наук. Ульяновск, 1984. - 84 с.

13. Ганюшкин, В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии / В.Я. Ганюшкин. Ульяновск, 1988. - 45 с.

14. Ганюшкин, В.Я. Реакция нарастания титра фага при диагностике паратифа поросят / В.Я. Ганюшкин // Ветеринария. — 1967. № 3. - С. 69 -71.

15. Гольдфарб, Д.М. Бактериофагия / Д.М. Гольдфарб. М.: Медгиз, 1961.- 299 с.

16. Гольдфарб, Д.М. Индикация брюшнотифозной палочки в воде с помощью реакции нарастания титра фага / Д.М. Гольдфарб, З.С. Островская //ЖМЭИ.-1957.-№5.-С. 17.

17. Гольдфарб, Д.М. Опыт применения реакции нарастания титра фага для диагностики дизентерии / Д.М. Гольдфарб, В.Н. Кузнецова // ЖМЭИ. 1957.- № 8. — С. 90-94.

18. ГОСТ 28566-90 (СТ СЭВ 6646-89) Продукты пищевые. Метод выявления и определения количества энтерококков. — М.: Изд-во стандартов, 1990.-6 с.

19. Дехнич, А.В. Современные методы идентификации энтерококков / А.В. Дехнич, Р.С. Козлов, О.У. Стецюк // Антибиотики и химиотерапия. 1996. -т. 41.-№3.-С.32-39.

20. Еремина, А.К. Биологические свойства подвижных энтерококков / А.К. Еремина, В.И. Седов // ЖМЭИ. 1994. - № 6. - С.12 - 13.

21. Золотухин, С.Н. Изучение чувствительности E.coli О 157 к колифагам / С.Н. Золотухин, Н.И. Молофеева, Д.А. Васильев // Вестник УГСХА. 2001. -№ 11.-С. 59-63.

22. Золотухин, С.Н. Разработка оптимальных количественных параметров соотношения культуры и фага для получения препаратов с высокой активностью / С.Н. Золотухин, Л.П. Пульчеровская, Д.А. Васильев // Вестник УГСХА.-2004.-№ 12.-С. 50-53.

23. Золотухин, С.Н. Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий / С.Н. Золотухин // Автореф. дис. . д-ра биол. наук. Ульяновск, 2007. — 39 с.

24. Иващук, М.А. Усовершенствование лабораторной диагностики энтерококковой инфекции птиц / М.А. Иващук // Автореф. дис. . канд. ветеринар, наук. М., 2006. - 18 с.

25. Камбаратов, П.И. Значение РНФ при распознавании сальмонеллеза / П.И. Камбаратов // ЖМЭИ. 1963. - № 6. - С. 35.

26. Колычев, Н.М. Сперма быков как фактор передачи энтерококковой инфекции / Н.М. Колычев, М.И. Петрова, Л.И. Лазарева // Ветеринария. — 2006. -№ 11.-С. 23-25.

27. Кольпикова, Т.И. Фаготипирование листерий / Т.И. Кольпикова, И.А. Бакулов, В.М. Котляров // Ветеринария. 1990. - № 6. - С. 31 - 32.

28. Коритняк, Б.М. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Yesinia enterocolitica, разработка технологических параметров по их применению / Б.М. Коритняк // Автореф. дис. . канд. биол. наук. Саратов, 2005. - 20 с.

29. Кременчук, Г.А. Применение реакции нарастания титра фага для исследования объектов внешней среды / Г.А. Кременчук, М.А. Гицевич, К.П. Бояршинова // ЖМЭИ. 1961. - № 7. - С. 124.

30. Кривиский, A.C. Вирусы против микробов / A.C. Кривиский. М., 1962.- 162 с.

31. Крылов, В.Н. Фаготерапия / В.Н. Крылов // Химия и жизнь. 2002. - № З.-С. 11-15.

32. Крылова, М.Д. Применение бактериофагов для типирования бактерий / М.Д. Крылова // В книге: Бактериофагия. М.: Медгиз, 1961. - С. 220 - 257.

33. Крылова, М.Д. Схема фаготипирования нетоксигенных дифтерийных бактерий типа gravis / М.Д. Крылова // ЖМЭИ. 1970. - № 12. - С. 16 - 22.

34. Кузнецова, В.Н. Применение реакции нарастания титра фага для индикации дизентерийных бактерий в условиях внешней среды / В.Н. Кузнецова, М.И. Хазанов, Т.Н. Ремова // ЖМЭИ. 1960. - № 6. - С. 59.

35. Лебедев, В.И. Опыт применения РНФ в эпидемиологической практике / В.И. Лебедев // ЖМЭИ. 1963. - № 12. - С. 29.

36. Лихачев, Н.В. Метод диагностики паратифа свиней при помощи бактериофага / Н.В. Лихачев // Ветеринария. 1948. — № 7. - С. 32.

37. Лурия, С. Общая вирусология / С. Лурия, Д. Дарнелл. М.: Мир, 1970. - 397 с.

38. Ляпустина, Л.В. Бруцеллезные бактериофаги. Оптимизация технологии производства и способов применения в лабораторной диагностике бруцеллеза / Л.В. Ляпустина // Автореф. дис. . д-ра биол. наук. — Ставрополь, 2004. 41 с.

39. Макушенко, A.C. Энтерококки: экологическое и клиническое значение в современных условиях / A.C. Макушенко // Лабораторная диагностика. — 2002.-№3.-С. 43-45.

40. Мащенюк, О.Ю. Идентификация бактерий Pseudomonas mallei с помощью бактериофагов / О.Ю. Мащенюк, И.В. Воложанцев // Микробиология. 1994. - № 3. - С. 537 - 544.

41. Медицинская микробиология / главные редакторы акад. РАМН В.И. Покровский, проф. O.K. Поздеев. М.: ГЭОТАР Медицина, 1999. - 162 с.

42. Методические указания по лабораторной диагностике стрептококкоза животных. МСХ СССР, М., 1990.

43. Молофеева, Н.И. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов E.coli О 157 и их применение в диагностике / Н.И. Молофеева // Автореф. дис. . канд. биол. наук. Саратов, 2004. - 20 с.

44. О специфичности листериозных бактериофагов / И.А. Бакулов и др. // Ветеринария. 1990. - № 7. - С. 26 - 27.

45. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / под редакцией A.C. Лабинской, Л.П. Блинковой, A.C. Ещиной. М.: Медицина, 2004. - 576 с.

46. Определитель бактерий Берджи / под редакцией Дж. Хоулта и др.. 9-е издание. Т. 2. Перевод с англ. под редакцией акад. РАН Г.А. Заварзина. М.: Мир, 1997.-432 с.

47. Островская, H.H. К использованию метода нарастания титра фага для выявления бруцелл во внешней среде / H.H. Островская, Д.М. Гольдфарб // ЖМЭИ. — 1961. -№ 5. С. 145.

48. Панин, А.Н. К вопросу об энтерококковой инфекции / А.Н. Панин // Ветеринария. 1991. - № 1. - С. 25 - 26.

49. Покровский, В.И. Проблемы внутрибольничных инфекций / В.И. Покровский // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 1996. № 2. — С. 4.

50. Покровский, В.И. Современные принципы и методы диагностики инфекционных болезней / В.И. Покровский, O.A. Дунаевский // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2001. - № 4. — С. 5 - 7.

51. Пономарев, А.П. Электронно-микроскопическое выявление вирусов животных в неконцентрированных вирусосодержащих суспензиях / А.П. Пономарев, О.Г. Андреева, Т.Н. Артамонова // Вестник РАСХН. 2002. — № 2. - С. 74 - 77.

52. Попхадзе, М.З. Использование бруцеллезного фага для диагностики бруцелл / М.З. Попхадзе // ЖМЭИ. 1968. - № 2. - С. 119 - 124.

53. Пульчеровская, Л.П. Выделение и изучение основных биологических свойств бактериофагов Citrobacter и их применение в диагностике /Л.П. Пульчеровская // Автореф. дис. . канд. биол. наук. Саратов, 2004. -21 с.

54. Ревенко, И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике / И.П. Ревенко. Киев: Урожай, 1978. — С. 88.

55. Результаты многоцентрового исследования антибиотико-чувствительности энтерококков / C.B. Сидоренко и др. // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - 43, № 9. - С. 9 - 18.

56. Русалеев, B.C. Таксономия вирусов бактерий / B.C. Русалеев // Ветеринария. 1990. - № 12. - С. 25 - 28.

57. Русалеев, B.C. Фагочувствительность аэробных спорообразующих бактерий / B.C. Русалеев // Ветеринария. 1990. - № 8. - С. 29 - 30.

58. Седов, В. И. Проблема антибиотикотерапии энтерококковых инфекций / В.И. Седов // Антибиотики и химиотерапия. — 1993. — т. 38 № 7. С. 55 — 59.

59. Седов, В.И. Выделение и количественный учет подвижных энтерококков / В.И. Седов, А.К. Еремина // Клиническая лабораторная диагностика. 1998. - № 11. - С. 17 - 19.

60. Седов, В.И. Лабораторная диагностика энтерококковой инфекции. Методические рекомендации / В.И. Седов. Иваново, 1983.

61. Сидоренко, C.B. Антибактериальная терапия: кризис жанра или свет в конце тоннеля? / C.B. Сидоренко // Русский медицинский журнал. 2003. - т. 11 № 6. - С. 7 - 20.

62. Смирнов, И.В. Возбудители бактериальных инфекций человека / И.В. Смирнов // КМАХ. 2000. - т. 2 № 2. - С. 4 - 11.

63. Субботин, В.В. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных животных с симптомокомплексом диареи /В.В. Субботин // Ветеринария. 2001. - № 4. - С. 3 - 7.

64. Таксономия микроорганизмов и методы их идентификации / Е.В. Авдеева и др. Калининград: КГТУ, 2003.

65. Тараканов, Б.В. Регуляция микробных процессов в рубце жвачных животных бактериофагами Streptococcus bovis / Б.В. Тараканов // Микробиология. 1994. - № 4. - С. 23.

66. Тимаков, В.Д. Реакция нарастания титра фага (РНФ) / В.Д. Тимаков, Д.М. Гольдфарб. -М., 1962. 32 с.

67. Тимаков, В.Д. Экспериментальное обоснование нового принципа обнаружения дизентерийных и брюшнотифозных бактерий с помощью фага / В.Д. Тимаков, Д.М. Гольдфарб // ЖМЭИ. 1956. - № 10. - С. 3 - 7.

68. Тихоненко, A.C. Ультраструктура вирусов бактерий / A.C. Тихоненко. -М.: Наука, 1968-С. 89.

69. Тюрин, В.П. Современные взгляды на лечение энтерококкового эндокардита / В.П. Тюрин, Ю.Г. Тихонов // КМАХ. 2004. - т. 6 № 4. - С. 360-364.

70. Цветков, К.И. Применение специфического бактериофага для диагностики паратифозного аборта кобыл / К.И. Цветков // Ветеринария. -1941.-№ 6.-С. 4-6.

71. Цветкова, И.А. Обоснование, конструирование и стандартизация индикаторных дисков для определения чувствительности энтерококков к антибиотикам / И.А. Цветкова // Автореф. дис. . канд. биол. наук. — С.-Пб., 2007. 20 с.

72. A 24-hour screening protocol for identification of vancomycin-resistant Enterococcus faecium / S .J. Drews et al. // J. of Clinical Microbiol. 2006. - 44, №4.-P. 1578- 1580.

73. A multicentre study: Staphylococcus and Enterococcus susceptibility to antibiotics / A. Turano et al. // Eur. J. Epidemiol. 1994. - № 5. - P.567 - 572.

74. Accuracy of the VITEC 2 system to detect glycopeptide resistance in Enterococci / N. Braak et al. // J. of Clinical Microbiol. 2001. - 39, № 1. - P. 351 -353.

75. Adhesion to bile drain materials and physicochemical surface properties of Enterococcus faecalis strains grown in the presence of bile / K. Waar et al. // Appl. and Environ. Microbiol. 2002. - 68, № 8. - P. 3855 - 3858.

76. Bacteriophage therapy rescues mice bacteremic from a clinical isolate of vancomycin-resistant Enterococcus facium / B. Biswajit et al. // Infection and Immunity. 2002. - 70, № 1. - P. 204 - 210.

77. Bell, J.M. Emergence of vancomycin-resistant Enterococci in Australia: phenotypic and genotypic characteristics of isolates / J.M. Bell, J.C. Paton, J. Turnidge // J. of Clinical Microbiol. 1998. - 36, № 8. - P. 2187 - 2190.

78. Bosley, G.S. Rapid identification of Enterococci / G.S. Bosley, R.R. Facklam, D. Grossman // J. of Clinical Microbiol. 1983. - 18, № 5. - P. 1275 -1277.

79. Bradley, D. The morphology and physiology of bacteriophages as revealed by the electron microscope / D. Bradley // J. Roy Micros. Soc. 1965. - № 84. -P. 141 - 145.

80. Brock, T.D. Survey of the bacteriocines of Enterococci / T.D. Brock, B. Peacher, D. Pierson // J. of Bacteriol. 1963. - 86. - P. 702 - 707

81. Caprioli, T. Phage typing scheme for group D Streptococci isolated from human urogenital tract / T. Caprioli, F. Zaccour, S.S. Kasatiya // J. of Clinical Microbiol. 1975. - 2, № 2. - P. 311 - 317.

82. Cassell, G.H. Emergent antibiotic resistance: Health risks and economic impact / G.H. Cassell // FEMS Immunol, and Med. Microbiol. 1997. - 18, № 4. -P. 271 -274.

83. Classification and identification of Enterococci: a comparative phenotypic, genotypic and vibrational spectroscopic study / C. Kirschner et al. // J. of Clinical Microbiol.-2001.-39, №5.-P. 1763- 1770.

84. Clonal diversity of vancomycin-resistant enterococci from an outbreak in a tertiary care university hospital / Ch.L. Pearce et al. // Amer. J. Infec. Contr. -1998. 26, № 6. - P. 563 - 568.

85. Comparison of conventional and molecular methods for identification of aerobic catalase-negative gram-positive in the clinical laboratory / P.P. Bosshard et al. // J. of Clinical Microbiol. 2004. - 42, № 5. p. 2065 - 2073.

86. Contamination of respiratory therapy equipment with VRE: Abstr. APIC 24th Annu. Educ. Conf. and Int. Meet., New Orleans, La, June 8 12, 1997 / D.J. Mikolich et al. // Amer. J. Infect. Contr. - 1997. - 25, № 2. - P. 145.

87. Das, I. Are glycopeptide-resistant enterococci in animals a threat to human beings? / I. Das, A. Fraise, R. Wise // Lancet. 1997. - 349, № 9057. - P. 997 -998.

88. Deibel, R.H. Physiology of the Enterococci as related to their taxonomy / R.H. Deibel, D.E. Lake, C.F. Niven // J. of Bacteriol. 1963. - 86. - P. 1275 -1282.

89. Deibel, R.H. The group D Streptococci / R.H. Deibel // Bacteriological reviews. 1964. - 28, № 3. - P. 330 - 366.

90. Detection of vancomycin-resistant enterococci colonization in a children's hospital / J.C. Christenson et al. // Amer. J. Infec. Contr. 1998. - 26, № 6. - P. 569-571.

91. Effect of raw-milk cheese consumption on the Enterococcal flora of human feces / R. Gelsomino et al. // Appl. And Environ. Microbiol. 2003. - 69, № 1. -P. 312 — 319.

92. Epidemiology of antimicrobial resistance in enterococci of animal origin / E. Hershberger et al. // J. of Antimicrob. Chemother. 2005. - 55, № 1. - P. 127 -130.

93. Facklam, R. Identification, classification, and clinical relevance of catalase-negative, gram-positive cocci, excluding the Streptococci and Enterococci / R. Facklam, J.A. Elliott // Clinical Microbiol. Reviews. 1995.-8, № 4. - P. 479 -495.

94. Facklam, R.R. Identification of Enterococcus species isolated from human infections by a conventional test scheme / R.R. Facklam, M.D. Colins // J. of Clinical Microbiol. 1989. - 27, № 4. - P. 731 - 734.

95. Frankenberg, L. Enterococcus faecalis heme-dependent catalase / L. Frankenberg, M. Brugna, L. Hederstedt // J. of Bacteriol. 2002. - 184, № 22. - P. 6351 -6356.

96. Genetic variation and evolution of the pathogenicity island of Enterococcus faecalis / Sh.M. McBride et al. // J. of Bacteriol. 2009. - 191, № 10. - P. 3392 -3402.

97. Hanson, K.L. Comparison of simple and rapid methods for identifying Enterococci intrinsically resistant to vancomycin / K.L. Hanson, C.P. Cartwright // J. of Clinical Microbiol. 1999.-37, № 3. - P. 815 - 817.

98. Identification and analysis of recombineering functions from Gram-negative and Gram-positive bacteria and their phages / S. Datta et al. // PNAS. 2008. -105, №5.-P. 1626-1631.

99. Identification of broadly active phage lytic enzyme with lethal activity against antibiotic-resistant Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium / P. Yoong et al. // J. of Bacteriol. 2004. - 186, № 14. - P. 4808 - 4812.

100. Identification of catalase-negative, non-beta-hemolytic, gram-positive cocci isolated from milk samples / M. Fortin et al. // J. of Clinical Microbiol. 2003. — 41, № l.-P. 106-109.

101. In silico and in vivo evaluation of bacteriophage <p EF24C, a candidate for treatment of Enterococcus faecalis infections / J. Uchiyama et al. // Appl. and Environ. Microbiol. 2008. - 74, № 13. - P. 4149 - 4163.

102. Infection of central nervous system by motile Enterococcus: first case report / A. Kurup et al. // J. of Clinical Microbiol. 2001. - 39, № 2. - P. 820 - 822.

103. Intrahospital spread of vancomycin-resistant Enterococcus faecium in Sweden / E. Torell et al. // Scand. J. Infec. Diseases. 1997. - 29, № 3. - P. 259 -263.

104. Jett, B.D. Virulence of Enterococci / B.D. Jett, M.M. Huycke, M.S. Gilmore // Clinical Microbiol. Reviews. 1994. - 7, № 4. - P. 462 - 478.

105. Klein, G. Antiotic resistance patterms of enterococci and occurrence of VRE in raw minced beef and pork in Germany / G. Klein, A. Pack, G. Reuter // Appl. and Environ. Microbiol. 1998. - 64, № 5. - P. 1825 - 1830.

106. Laukova, A. Distribution and characterization of Enterococcus species in municipal sewages / A. Laukova, P. Juris // Microbios. 1997. - 89, № 359. - P. 73 - 80.

107. Low faecal carrier rate of vancomicin resistant enterococci in Norwegian hospital patients / G.S. Simonsen et al. // Scand. J. Infec. Diseases. 1998. - 30, №5.-P. 465-468.

108. Manero, A. Identification of Enterococcus spp. with a biochemical key / A. Manero, A.R. Blanch // Appl. and Environ. Microbiol. 1999. - 65, № 10. - P. 4425-4430.

109. Meeting review. The seventh international conference on the genetics of Streptococci, Lactococci and Enterococci / R.A. Burne et al. // J. of Bacteriol. -2007. 189, № 4. - P. 1209 - 1218.

110. Moellering, R.C. Vancomicin-resistant enterococci / R.C. Moellering // Clin. Infec. Diseases. 1998. - 26, № 5. - P. 1196 - 1199.

111. Murray, B.E. Editorial response: What can we do about vancomycin-resistant enterococci? / B.E. Murray // Clin. Infec. Diseases. 1995. - 20, № 5. -P. 1134-1136.

112. Murray, B.E. Pathogenicity of enterococci and problems of glycopeptide resistance / B.E. Murray // Kansenshogaku zasshi — J. Jap. Assoc. Infec. Diseasea. 1999. - 73, № 8. - P.795.

113. Murray, B.E. The life and times of the Enterococcus / B.E. Murray // Clinical Microbiol. Reviews. 1990. - 3, № 1. - P. 46 - 65.

114. Occurence and significance of Enterococcus faecium resistant to vancomycin / U.P. Zimmermann et al. // Antiinfec. Drugs and Chemother. — 1998. 16, № 2. - P. 147 - 149.

115. Occurrence and relatedness of vancomycin-resistant Enterococci in animals, humans, and the environment in different European regions / I. Kiihn et al. // Appl. and Environ. Microbiol. 2005. - 71, № 9. - P. 5383 - 5390.

116. Occurrence of VRE in humans and animals in the Czech Republic between '2002 and 2004 / M. Kolar et al. // J. of Medic. Microbiol. 2005. - 54. - P. 965 -967.

117. Preliminary evidence for the unrelatedness of human VREF infection from poultry: Abstr. 175th Meet. Pathol. Soc. Gr. Brit. And Irel., Sheffield, 2-4 July, 1997 / M. Kirk et al. // J. Med. Microbiol. 1997. - 46, № 12. - P. 1056.

118. Qamer, Sh. Use of colony morphology to distinguish different Enterococcal strains and species in mixed culture from clinical specimens / Sh. Qamer, J.A.T. Sandoe, K.G. Kerr // J. of Clinical Microbiol. 2003. - 41, № 6. - P. 2644 - 2646.

119. Resistance of enterococci to ampicillin and glycopeptide antibiotics in Italy: Pap. Symp. Bact. Resist.: Lab. Explan. And Clin. Conseq., Surrey, 15-17 Apr.,1996 / R. Fontana et al. // Clin. Infec. Diseases. 1998. - 27, Suppl. № 1. - P. 84 -86.

120. Rogers, C.G. Characterization of the Enterococcus bacteriophages from the small intestine of the rat / C.G. Rogers, W.B. Sarles // J. of Bacteriol. 1963. - 85. -P. 1378- 1385.

121. Ruoff, K.L. Resent taxonomic changes in the genus Enterococcus / K.L. Ruoff // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 1990. - v. 9. - P. 75 - 79.

122. Sherman, J.M. The enterococci and related streptococci / J.M. Sherman // Bacteriol. 1938. - v. 35. - P. 81 - 93.

123. Stool carrical isolation, and mortality during an outbreak of vancomycin-resistant enterococci in hospitalized medical and/or surgical patients / C. Wells et al. // Clin. Infec. Diseases. 1995. - 21, № 1. - P. 45 - 50.

124. Susceptibility testing of clinical isolates of Enterococcus faecium and Enterococcus faecalis / M. Louie et al. // J. of Clinical Microbiol. — 1992. 30, № 1.-P. 41 -45.

125. Tang, Yi-Wei Molecular diagnostics of infectious diseases / Yi-Wei Tang, G.W. Procop, D.H. Persing // Clinical chemistry. 1997. - 43, № 11. - P. 2021 -2038.

126. Tritz, D.M. Evaluation of microscan for identification of Enterococcus species / D.M. Tritz, P.C. Iwen, L.W. Gail // J. of Clinical Microbiol. 1990. - 28, №6.-P. 1477- 1478.

127. Tucci, V. Epidemiology and control of vancomycin-resistant enterococci in an adult and children's hospital / V. Tucci, M.A. Haran, H.D. Isenberg // Amer. J. Infec. Contr. 1997. - 25, № 5. - P. 371 - 376.

128. Vancomycin resistant enterococci (VRE): is it possible?: Abstr. APIC 24th Annu. Educ. Conf. and Int. Meet., New Orleans, La, June 8- 12, 1997 / N. White et al. // Amer. J. Infec. Contr. 1997. - 25, № 2. - P. 145.

129. Vancomycin-resistant Enterococcus faecalis: Now also in Belgium / J. Coene et al. // Acta clin. belg. 1995. - 50, № 1. - P. 46 - 47.

130. Varying linezolid susceptibility of vancomycin-resistant Enterococcus faecium isolates during therapy: a case report / S. Swobodal et al. // J. Antimicrob. Chemother. 2005. - 56. - P. 787 - 789.

131. Virus Taxonomy. Classification and Nomenclature of Viruses. Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses / Edited by M. H. V. van Regenmortel et al.. San Diego: Academic Press, 2000. - P. 43 - 53, 64 - 129.

132. Yang, H.-Y. Construction of integration-proficient vector based on the site-specific recombination mechanism of Enterococcal temperate phage cj> FC1 / H.-Y. Yang, Y.-W. Kim, H.-Ihl. Chang // J. of Bacteriol. 2002. - 184, № 7. - P. 1859 -1864.

133. Young, R. Bacteriophage lysis: mechanism and regulation / R. Young // Microbiol. Reviews. 1992. - 56, № 3. - P. 430-481.