Фитохимическое изучение надземной части гравилата речного (Geum rivale L.) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Орлова Анастасия Андреевна

• Орлова Анастасия Андреевна
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Орлова Анастасия Андреевна

ВВЕДЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Подходы к исследованию полифенольных соединений

1.1.1 Экстракция полифенольных соединений из растительного материала

1.1.1.1 Традиционные методы экстракции и пути их интенсификации

1.1.1.2 Микроволновая экстракция

1.1.1.3 Ультразвуковая экстракция

1.1.1.4 Экстракция жидкостью под давлением

1.1.1.5 Методы экстракции с приложением электрического потенциала

1.1.1.6 Метод субкритической флюидной экстракции

1.1.2 Идентификация и количественный анализ полифенольных соединений

1.1.2.1 Использование спектрофотометрии и спектроскопии в УФ и видимой области

1.1.2.2 Хроматографические методы идентификации и количественной оценки полифенолов

1.1.2.3 Спектроскопия ядерного магнитного резонанса

1.1.2.4 Другие методы анализа

1.1.2.5. Метаболомные подходы в анализе растительного материала

1.1.3 Подходы к исследованию фармакологической активности полифенольных соединений

1.1.3.1 Антиоксидантные свойства полифенолов

1.1.3.2 Эффекты полифенолов при ишемически-реперфузионных поражениях сердечно-сосудистой и цереброваскулярной систем

1.1.3.3 Антимикробная и противовирусная активность полифенолов

1.1.3.4. Противоопухолевая активность полифенольных соединений

1.1.3.5. Другие фармакологические эффекты полифенольных соединений

1.1.3.6. Скрининг фармакологической активности природных соединений методом т 8Шсв

1.2 Характеристика объекта исследования - гравилата речного (Geum rivale L.)

1.2.1 Систематическое положение и распространение гравилата речного (Geum rivale L.)

1.2.2 Состав вторичных метаболитов гравилата речного

1.2.3 Фармакологическая активность метаболитов гравилата речного (Geum rivale L.)

Выводы по главе

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Объект исследования

2.2 Оборудование

2.3. Методы фитохимического анализа

2.3.1. Экстракция и фракционирование

2.3.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография с диодно-матричным детектором

2.3.3 Высокоэффективная тонкослойная хроматография

2.3.4 Масс-спектрометрия и тандемная масс-спектрометрия

2.3.5. Метаболомный анализ первичных метаболитов

2.3.6. Выделение индивидуальных соединений

2.3.7 Установление точных структур соединений методом ЯМР-спектроскопии

2.4 In silico скрининг фармакологического потенциала природных соединений

ГЛАВА 3. ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЙ ФИТОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ГРАВИЛАТА РЕЧНОГО

3.1 ВЭЖХ-УФ скрининг фракций различной полярности, полученных из надземной части гравилата речного

3.2 ВЭТСХ скрининг фракций различной полярности, полученных из надземной части гравилата речного

л

3.3 ВЭЖХ-МС/МС анализ н-бутанольной и водной фракций, полученных из надземной части гравилата речного

Выводы из главы

ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ СОСТАВА ПЕРВИЧНЫХ МЕТАБОЛИТОВ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ГРАВИЛАТА РЕЧНОГО С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТАБОЛОМНЫХ ПОДХОДОВ

4.1 Профилирование первичных метаболитов надземной части гравилата речного

4.2 Изучение путей вторичного метаболизма

Выводы из главы

ГЛАВА 5. ВЫДЕЛЕНИЕ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ИЗ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ГРАВИЛАТА РЕЧНОГО

Выводы из главы

ГЛАВА 6. Ш БШСО ОЦЕНКА ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА ВЫДЕЛЕННЫХ ПРИРОДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ

6.1 1п 8Шсв оценка фармакологического потенциала суммы выделенных полифенольных соединений

6.2 1п 8Шсв оценка фармакологического потенциала отдельных компонентов

Выводы из главы

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Приложение А - Акты о внедрении результатов диссертационной работы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фитохимическое изучение надземной части гравилата речного (Geum rivale L.)»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. В мировой практике использование растительного сырья и веществ растительного происхождения для создания лекарственных препаратов и субстанций растительного происхождения является актуальным направлением. Возрастает интерес к препаратам на основе индивидуальных низкомолекулярных растительных метаболитов, которые способны проявлять широкий спектр фармакологической активности и обладают менее выраженными побочными эффектами в сравнении с синтетическими лекарственными препаратами. Несмотря на это, лишь небольшая часть фармакологического потенциала природных соединений используется современной Российской медициной. Основной причиной этого является недостаточность научно-обоснованных данных о биологически активных метаболитах растений, распространенных на территории нашей страны.

Ряд успешных примеров лекарственных препаратов, созданных на основе индивидуальных природных соединений, подтверждает перспективу таких исследований и позволяет определить их последующее развитие. Поиск и разработка фармацевтических субстанций природного происхождения с применением современных химико-аналитических технологий более экономична, особенно с учётом обширной ресурсной базы России. Наличие значительного объёма накопленных знаний в области отечественной флористики, ресурсоведения, фитохимии и этнофармакологии в сочетании с современными методами позволяют существенно оптимизировать скрининг новых природных молекул, повысить его эффективность.

Проведение исследований по выявлению растительных метаболитов, структуры которых ранее не были описаны, а также расширение знаний о метаболическом составе растений актуально с точки зрения фундаментальной и прикладной науки [34]. Для решения этих задач активно изучаются пути интенсификации процессов экстракции биологически активных соединений из растительного материала, подходов к определению профилей биологически активных веществ (БАВ) и установлению структуры отдельных соединений, а

также подходов к исследованию их фармакологической активности. В большинстве случаев каждая из перечисленных операций требует индивидуального подбора параметров для исследуемого растительного материала. Расширение знаний об оптимальных условиях анализа для отдельно взятых растительных объектов, как и разработка универсальных подходов к каждому этапу исследований, могут являться ключом к интенсификации фитохимических исследований в целом.

Фармацевтическая разработка новых субстанций и лекарственных препаратов подразумевает изучение методов их стандартизации. На сегодняшний день в Государственной фармакопее Российской Федерации XIV издания ключевым показателем качества лекарственного растительного сырья является содержание биологически активных веществ. Однако методы, включенные в фармакопейные статьи, основываются на оценке суммарного содержания основной группы БАВ спектрофотометрическими, титриметрическими и гравиметрическими методами, характеризуются низкой точностью в связи с отсутствием этапа очистки анализируемого извлечения от балластных веществ в процессе пробоподготовки и использованием невысокоточных аналитических методов. Углубленное фитохимическое изучение растительных объектов и выделение вторичных метаболитов в индивидуальном виде позволит разработать новые подходы к стандартизации растительного материала и разрабатываемых фармацевтических субстанций по ключевому компоненту БАВ с использованием высокоточного аналитического оборудования.

Изучение лекарственного потенциала растений, распространенных на территории Российской Федерации, является актуальным, ввиду доступной естественной сырьевой базы и возможности их введения в культуру. К таким растениям относится гравилат речной (Geum rivale L.) - многолетнее травянистое растение семейства розовые (Rosaceae), широко применяемое в народной медицине в качестве противовоспалительного, антисептического и вяжущего средства [141, 142]. Анализ имеющихся литературных данных показал, что исследования гравилата речного достаточно отрывочны и не носят системного

характера, что делает его перспективным объектом для изучения состава вторичных метаболитов и возможностей их использования в медицинской практике.

Степень разработанности темы исследования. Тема исследования полифенольных соединений не теряет актуальности уже более 40 лет, ввиду их высокого структурного разнообразия, широкого распространения в растительных объектах и многообразия фармакологических свойств.

В последние годы активно ведутся работы, направленные на изучение процессов интенсификации экстрагирования растительных полифенолов традиционными методами [1, 2], осуществляются разработки новых методов экстракции, таких как ультразвуковая [11-18] и микроволновая экстракция [5-10], экстракция жидкостью под давлением [20], субкритическая флюидная экстракция [33-34], экстракция с приложением электрического потенциала [23, 26, 27] и другие. Рассматриваются методы идентификации, качественного и количественного анализа полифенольных соединений в растительном материале. Особое внимание в настоящее время уделяется инструментальным физико-химическим методам - хроматографическим [57-61], спектроскопическим [35-36, 46, 74, 84], а также метаболомным исследованиям растений с использованием данных методов [91, 93].

Большое количество публикаций посвящено вопросам изучения фармакологической активности растительных полифенолов. Показаны многообещающие результаты в экспериментах по установлению их антиоксидантных [102], антимикробных и противовирусных [115, 117], противоопухолевых свойств [123]. Кроме того, показана возможность использования полифенолов в качестве средств профилактики и лечения таких социально-значимых патологических состояний, как сахарный диабет [130], тромбозы различного генеза [127], заболевания печени [129] и сердечнососудистой системы [107], а также нейродегенеративные заболевания [132].

Отдельные публикации посвящены исследованию состава метаболитов надземной и подземной части гравилата речного. Первые исследования данного

растения были проведены в Ленинградском химико-фармацевтическом институте К.Ф. Блиновой в 50-х годах XX века [145] и были посвящены изучению эфирного масла корневищ гравилата речного. Эти исследования нашли продолжение в работах Krupinska A. (1970), Vollmann et al. (1995) и Owczarek et al. (2013) [146148]. В работах Panizzi et al. (2000), Морозовой и др. (2009) и Owczarek et al. (2013) установлено наличие в надземной и подземной частях гравилата речного отдельных тритерпеноидов и полифенолов [150, 153, 154]. Недавние работы посвящены изучению состава гидролизуемых танинов и производных эллаговой кислоты (Moilanen et al. (2008, 2015), Owczarek et al. (2017)) [162, 163, 165]. С точки зрения изучения фармакологических свойств гравилата речного, в период с 1995 по 2017 год был проведен ряд исследований антиоксидантной, противовоспалительной, противомикробной и противовирусной активности суммарных извлечений и фракций различной полярности [151, 154, 179, 185, 187].

Таким образом, исследование химического состава надземной и подземной частей гравилата речного и их фармакологической активности весьма отрывочны и не носят системного характера. Кроме того, анализ литературных данных показал преобладание работ зарубежных авторов. Данные факты подтверждают актуальность проведения полного фитохимического исследования гравилата речного с использованием современных методов.

Цели и задачи работы. Целью исследования являлось фитохимическое изучение надземной части гравилата речного (Geum rivale L.) как перспективного источника БАВ полифенольной природы для последующего внедрения в отечественную фармацевтическую промышленность.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1. Провести анализ литературных данных о современных подходах к исследованию полифенольных соединений, о составе биологически активных веществ надземной части гравилата речного, путях его использования в традиционной медицине и исследованиях фармакологической активности извлечений и индивидуальных соединений;

2. Провести анализ первичных метаболитов надземной части гравилата речного с последующим прогнозированием вероятных путей биосинтеза вторичных метаболитов;

3. Получить фракции спиртоводного извлечения из надземной части гравилата речного и изучить химический состав полученных фракций;

4. Идентифицировать биологически активные вещества полифенольной природы в полученных фракциях;

5. Выделить полифенольные соединения в индивидуальном виде, установить их точную структуру;

6. Определить возможные виды биологической активности суммы полифенольных соединений и отдельных компонентов с использованием метода in silico.

Научная новизна работы. В ходе исследования впервые проведен скрининг вторичных метаболитов надземной части гравилата речного (Geum rivale L.) с использованием методов ВЭТСХ и хромато-масс-спектрометрии, установлен состав первичных метаболитов с использованием метаболомных подходов.

В ходе исследования выделено 30 соединений в индивидуальном виде, 13 из которых получены в количестве, достаточном для установления структуры, из них два новых природных соединения - производных флавонолов (кемпферол-бис-3,7-0-Р-0-глюкуронид и изорамнетин-бис-3,7-0-Р-0-глюкуронид), и 7 соединений, впервые обнаруженных в надземной части гравилата речного (изорамнетин-3-О-Р-О-глюкозид, 3-О-метилэллаговая кислота, кафеоил-яблочная кислота, 3,4-дигидроксибензойная кислота, 6"-(4-гироксициннамоил)-астрагалин, изорамнетин-3-О-Р-О-глюкуронид, кверцетин-бис-3,7-0-Р-0-глюкуронид).

Впервые проведено прогнозирование возможных фармакологических эффектов для суммы полифенольных соединений, структуры которых были установлены в ходе исследования, и для новых природных соединений с использованием метода in silico. Рассмотрена возможность использования выделенных соединений в качестве источников получения новых фитосубстанций

для создания эффективных и безопасных лекарственных средств, субстанций растительного происхождения и продуктов функционального питания.

Теоретическая и практическая значимость работы. Разработана методика фракционирования суммарного водно-спиртового извлечения из надземной части гравилата речного, основанная на различиях в полярности вторичных метаболитов. С использованием современных инструментальных методов проведены скрининговые исследования, направленные на определение групповой принадлежности вторичных метаболитов в фракциях различной полярности.

Рассмотрена возможность использования метаболомных подходов для прогнозирования состава вторичных метаболитов в растительном сырье. Показано, что с использованием метаболомного анализа первичных метаболитов на основе метода ГХ-МС, можно установить соединения-интермедиаты основных метаболических путей биосинтеза вторичных метаболитов и, как следствие, осуществить прогноз основных групп БАВ, содержащихся в растительном материале.

Разработана методика выделения индивидуальных соединений полифенольной природы с использованием методов открытой колоночной хроматографии и препаративной ВЭЖХ.

Установлен состав вторичных метаболитов полифенольной природы надземной части гравилата речного, выделены в индивидуальном виде метаболиты, ранее не описанные для данного объекта. Кроме того, выделено 2 новых природных соединения - кемпферол-бис-3,7-О-Р^-глюкуронид и изорамнетин-бис-3,7-О-Р^-глюкуронид.

Рассмотрена возможность использования вторичных метаболитов надземной части гравилата речного в качестве источников получения фитосубстанций для создания безопасных лекарственных средств с доказанной эффективностью, субстанций растительного происхождения и продуктов функционального питания.

Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедры фармакогнозии (акт внедрения от 11.06.2021) и в научно-исследовательскую деятельность кафедры фармакогнозии (акт внедрения от 11.06.2021) федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, а также в производственный процесс компании АО «Фармпроект» (акт о внедрении от 10.06.2021).

Методология и методы исследования. Объектом исследования являлась надземная часть гравилата речного (Geum rivale L.) - многолетнего травянистого растения семейства розовые (Rosaceae).

Методология исследования заключалась в использовании комплекса современных физико-химических методов анализа, направленных на всестороннее фитохимическое исследование растительного материала.

Фракционирование осуществляли методом жидкость-жидкостной экстракции с использованием растворителей различной полярности. Скрининг основных групп вторичных метаболитов производили с использованием ВЭЖХ-УФ, ВЭТСХ, ВЭЖХ-МС/МС2, метаболомных подходов на основе ГХ-ПИД-МС. Первичную очистку полученных фракций производили методом открытой колоночной хроматографии на сорбентах различной селективности, контроль эффективности разделения осуществляли путем ВЭЖХ-УФ и ТСХ. Выделение вторичных метаболитов в индивидуальном виде осуществляли методом препаративной ВЭЖХ, установление структуры полученных соединений основывалось на одномерной и двумерной спектроскопии ядерного-магнитного резонанса и масс-спектрометрии высокого разрешения. Оценку вероятного профиля фармакологической активности осуществляли с использованием программного обеспечения PASS и PharmaExpert, а также на основании поиска вероятных активностей по структурному сходству в базе данных CortelHs Drug Discovery Intelligence.

Положения, выносимые на защиту.

На защиту выносятся следующие положения и результаты, определяющие новизну и практическую значимость исследования:

1. Состав и фракционное распределение вторичных метаболитов надземной части гравилата речного;

2. Профиль первичных метаболитов надземной части гравилата речного и анализ возможных путей биосинтеза вторичных метаболитов;

3. Структуры индивидуальных соединений полифенольной природы, выделенных из надземной части гравилата речного;

4. 1п яШев прогноз фармакологической активности суммы выделенных метаболитов и отдельных природных соединений.

Степень достоверности и апробации результатов. Результаты работы доложены и обсуждены на научных российских и зарубежных мероприятиях (конференциях, конгрессах, симпозиумах и др.): УШ, IX, X и XI Всероссийской конференции студентов и аспирантов с международным участием «Молодая фармация - потенциал будущего» (г. Санкт-Петербург, 2018, 2019, 2020, 2021); 22-ом, 23-ем, 24-ом Международном конгрессе «Фитофарм» (Швейцария, г. Хорген, 2018, г. Санкт-Петербург, 2019, 2021); VI, VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Инновации в здоровье нации» (Санкт-Петербург, 2018, 2019); международной научно-методической конференции, посвященной памяти выдающегося отечественного фармакогноста Адель Федоровны Гаммерман (1888-1978) «Гаммермановские чтения» (г. Санкт-Петербург, 2019); VI Российско-Финском Симпозиуме «Технологии будущего и основные направления создания новых лекарственных средств» (г. Санкт-Петербург, 2019) и VII Российско-Финском Симпозиуме «Санкт-Петербург и Турку: Общие проблемы в науках о жизни» (дистанционный формат, 2020); IX Съезде общества физиологов растений России «Физиология растений - основа создания растений будущего» (Казань, 2019); 3-ей Российской конференции с международным участием «Радиобиологические основы лучевой терапии» (Дубна, 2019).

Достоверность полученных результатов определяется их воспроизводимостью, использованием современных методов анализа и современного научного оборудования.

Публикации. По теме диссертационного исследования опубликовано 12 печатных работ. Из них 3 статьи в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки России (в т.ч. в изданиях, реферируемых в наукометрических базах данных Scopus, Web of Science), а также 1 статья в зарубежном журнале, индексируемом в Scopus, и 7 тезисов.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, в рамках тематики государственного задания «Разработка методологической концепции контроля качества лекарственных средств и субстанций природного происхождения с использованием инновационных аналитических методов» (регистрационный номер АААА-А20-120121790032-2 от 17.12.2020).

Соответствие научно-квалификационной работы паспорту научной специальности. Научные положения диссертационной работы соответствуют паспорту специальности 3.4.2 - фармацевтическая химия, фармакогнозия, а именно пункту 6 - изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе.

Личный вклад автора в проведенное исследование и получение научных результатов. Автор лично участвовал в формулировке цели исследования и постановке задач, сборе и анализе литературных данных, планировании экспериментальной работы, постановке экспериментов, обработке и интерпретации полученных результатов. Автор лично осуществлял оформление

тезисов и статей по тематике исследования. Личный вклад автора составил не менее 90%.

Объем и структура работы. Работа изложена на 174 страницах компьютерного набора (142 страницы основного текста), включает введение, обзор литературных данных, главу «Материалы и методы» и 4 главы экспериментальных исследований, заключение, список сокращений, список литературы, состоящий из 204 источников (из них 191 на иностранных языках), 1 приложение. Материалы исследования представлены 28 рисунками и 20 таблицами.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ABTS - 2,2'-азино-бис(3-этилбензотиазолин-6-сульфоновая кислота)

DPPH - 2,2-дифенил-1-пикрилгидразил

FRAP-тест (Ferric Reducing Antioxidant Power) - антиоксидантный тест по железо-восстанавливающей активности

MOA - O-метилгидроксиламина

MSTFA - №метил-Ы-(триметилсилил)-трифлюроацетамидом NO - оксид азота

PAF (Platelet-activating factor) - фактор активации тромбоцитов RI - индекс удерживания Rt - время удерживания

TOF (Time of flight) - времяпролетный масс-анализатор

АФК - активные формы кислорода

БУВ - бутанол-уксусная кислота-вода

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

л

ВЭЖХ-МС/МС - высокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с масс-спектрометрическим (тандемным масс-спектрометрическим) анализов

ВЭТСХ - высокоэффективная тонкослойная хроматография ГХ - газовая хроматография

ГХ-ПИД-МС - газовая хроматография в сочетании с масс-спектрометрическим исследованием, с использованием пламенно-ионизационного детектора

ДМСО^6 - дейтерированный диметилсульфоксид

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ДКИ - доклинические исследования

ИК-спектроскопия - инфракрасная спектроскопия

КИ - клинические исследования

ЛПНП - липопротеины низкой плотности

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ТФУ - трифторуксусная кислота

ТСХ - тонкослойная хроматограмма

УФ-излучение - ультрафилетовое излучение

цГМФ - циклический гуазинмонофосфат

ЦНС - центральная нервная система

ЦОГ-1 - циклооксигеназа 1

ЦОГ-2 - циклооксигеназа 2

ЯМР - ядерный магнитный резонанс

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Подходы к исследованию полифенольных соединений

1.1.1 Экстракция полифенольных соединений из растительного материала

1.1.1.1 Традиционные методы экстракции и пути их интенсификации

Традиционными методами экстракции растительного материала для получения суммы биологически активных веществ считаются различные методы мацерации и перколяция. В фитохимических исследованиях процесс перколяции используется крайне редко, а метод мацерации получил широкое распространение в различных аппаратурных и процедурных исполнениях.

Очевидно, что эффективность данного процесса зависит от целого ряда факторов: целевой группы метаболитов, природы экстрагента, соотношения количеств сырья и экстрагента, температуры, длительности процесса и ряда других. Именно поэтому при фитохимическом анализе растительного материала первоочередной задачей исследователя является подбор оптимальных и экономически выгодных условий экстрагирования.

Так, Jovanovic et al. (2017) провели исследование влияния ряда факторов на интенсивность извлечения полифенольных соединений с использованием традиционного метода. В ходе исследования показано, что оптимальным экстрагентом для полифенолов является 50% этанол, а время экстрагирования -60 минут. Кроме того, авторами было установлено, что повышение времени экстрагирования свыше 90 минут приводит к снижению выхода целевой группы метаболитов, в связи с чем использование более длительной экстракции является нецелесообразным [1].

Данное исследование соотносится с результатами Cujic et al. (2016) установившими оптимальные параметры мацерации для плодов аронии (Aronia melanocarpa [Michx] Elliot): экстрагент - 50% этанол, соотношение сырье-экстрагент 1:20, размер частиц измельченного сырья - 0,75 мм [2]; для шалфея лекарственного (Salvia officinalis L.) - проведение процедуры экстрагирования с

использованием 30% водного спирта или ацетона при температуре 60°С в течение 30 минут [3].

Оптимизация традиционных методов экстрагирования с использованием ступенчатых схем - достаточно часто встречающийся метод в фитохимических исследованиях. Были проведены исследования оптимальных условий экстракции полифенолов из косточек винограда на основе разработанной схемы: на первой ступени экстракцию проводили при комнатной температуре в темноте в течение часа 50% этанолом в соотношении сырье : экстрагент 1:5, для второй и третьей ступени экстракции использовали 96% этанол при описанных выше условиях. Показано, что наилучшим экстрагентом для полифенолов является спиртоводная смесь благодаря своим экстрагирующим свойствам и доказанной безопасности. Установлено, что оптимальным является двухстадийный процесс, обеспечивающий наиболее полную экстракцию полифенолов из растительного материала и наименьший выход балластных веществ [4].

Однако, с целью снижения трудозатрат и временных затрат на всех стадиях изучения растительного материала, а также поиска более экономически выгодных путей решения поставленных задач был создан ряд современных экстракционных методов, превосходящих традиционные по эффективности и рентабельности.

1.1.1.2 Микроволновая экстракция

Микроволновая экстракция растительного сырья в настоящее время активно изучается. Исследование микроволновой экстракции полифенолов из листьев мирта обыкновенного (Myrtus communis L.) показало, что данный метод превосходит традиционные методы, а также ультразвуковую экстракцию по конечной концентрации полифенолов, таких как флавоноиды и танины, в спиртовом извлечении. При этом оптимальными условиями экстрагирования оказались: экстрагент - 42% этанол, соотношение сырье:экстрагент 1:20 или 1:40, мощность микроволнового воздействия - 500 В в течение 62 секунд. Было показано, что данный метод позволяет получать большую концентрацию целевых

компонентов в вытяжке с меньшими затратами ресурсов (времени экстрагирования и расхода растворителей) [5].

Исследование по оптимизации процесса микроволнового экстрагирования полифенольных соединений из коры дуба тЬж L.) было проведено

Bouras et а1. (2015) [6]. Данное исследование подтверждает ранее полученные результаты [7, 8, 9, 10], демонстрируя увеличение эффективности экстракции полифенолов из растительного материала в 2-3 раза по сравнению с традиционными методами. Кроме того, в данной работе посредством ВЭЖХ-МС анализа удалось установить профили основных компонентов полифенольной фракции и показать увеличение интенсивности их пиков по сравнению с контрольным образцом, полученным традиционным методом экстракции при комнатной температуре.

1.1.1.3 Ультразвуковая экстракция

Одним из наиболее простых методов интенсификации процесса экстракции на сегодняшний день является использование ультразвука. Проведено большое количество исследований по сравнительному анализу различных методов традиционной экстракции растительного материала с ультразвуковой экстракцией, в ходе которых было установлено, что эффективность данного процесса зависит от тех же факторов, что и традиционные методы [11-13]. При сравнении экспериментальных данных, полученных различными научными группами с использованием рассматриваемого подхода, установлены его оптимальные параметры. В качестве растворителя предлагается использовать 5070% этанол, который, в сочетании с другими факторами, не только обеспечивает высокий выход полифенолов, но и обладает малой токсичностью, что дает возможность рассматривать такой подход как предпочтительный при получении полифенольных соединений для использования в пищевой промышленности или фармацевтической отрасли [14-15]. Показано, что использование соотношения сырье-экстрагент 1:40 и повышение температуры экстракции от 25°С до 60°С приводит не только к сравнительному увеличению количества извлекаемых

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Орлова Анастасия Андреевна, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Jovanovic, A. A. Optimization of the extraction process of polyphenols from Thymus serpyllum L. herb using maceration, heatand ultrasound-assisted techniques / A.A. Jovanovic, V.B. Bordevic, G.M. Zdunic, D.S. Pljevljakusic, K.P. Savikin, D.M. Godevac, B.M. Bugarski // Separation and Purification Technology. - 2017. - Volume 179. - P. 369-380.

2. Cujic, N. Optimization of polyphenols extraction from dried chokeberry using maceration as traditional technique / N. Cujic, K. Savikin, T. Jankovic, D. Pljevljakusic, G. Zdunic, S. Ibric // Food Chemistry. - 2016. - Volume 194. - P. 135-142. - DOI: 10.1016/j.foodchem.2015.08.008

3. Dent, M. The effect of extraction solvents, temperature and time on the composition and mass fraction of polyphenols in dalmatian wild sage (Salvia officinalis L.) extracts / M. Dent, V. Dragovic-Uzelac, M. Peni, M. Brni, T. Bosiljkov, B. Levaj // Food Technology and Biotechnology. - 2013. - Volume 51(1). - P. 84-91.

4. Nawaz, H. Extraction of polyphenols from grape seeds and concentration by ultrafiltration / H. Nawaz, J. Shi, G. S. Mittal, Y. Kakuda // Separation and Purification Technology. - 2006. - Volume 48(2). - P. 176-181. -DOI:10.1016/j.seppur.2005.07.006

5. Dahmoune, F. Optimization of microwave-assisted extraction of polyphenols from Myrtus communis L. leaves / F. Dahmoune, B. Nayak, K. Moussi, H. Remini, K. Madani // Food Chemistry. - 2015. - Volume 166. - P. 585-595. - DOI:10.1016/j.foodchem.2014.06.066

6. Bouras, M. Optimization of microwave-assisted extraction of polyphenols from Quercus bark / M. Bouras, M. Chadni, F. J. Barba, N. Grimi, O. Bals, E. Vorobiev // Industrial Crops and Products. - 2015. - Volume 77. - P. 590-601. - DOI:10.1016/j.indcrop.2015.09.018

7. Bai, X.-L. Optimization of microwave-assisted extraction of polyphenols from apple pomace using response surface methodology and HPLC analysis / X.-L. Bai, T.-L. Yue, Y.-H. Yuan, H.-W. Zhang // Journal of Separation

Science. - 2010. - Volume 33(23-24). - P. 3751-3758. -D01:10.1002/jssc.201000430

8. Zhang, G. Optimization of microwave-assisted enzymatic extraction of polyphenols from waste peanut shells and evaluation of its antioxidant and antibacterial activities in vitro / G. Zhang, M. Hu, L. He, P. Fu, L. Wang, J. Zhou // Food and Bioproducts Processing. - 2013. - Volume 91(2). - P. 158-168. -D0I:10.1016/j.fbp.2012.09.003

9. Moreira, M.M. A novel application of microwave-assisted extraction of polyphenols from brewer's spent grain with HPLC-DAD-MS analysis / M.M. Moreira, S. Morais, A.A. Barros, C. Delerue-Matos, L.F. Guido // Analytical and Bioanalytical Chemistry. - 2012. - Volume 403. - P. 1019-1029. - DOI: https://doi.org/10.1007/s00216-011-5703-y

10. Zhang, L. Microwave-assisted extraction of polyphenols from Camellia oleifera fruit hull / L. Zhang, Y. Wang, D. Wu, M. Xu, J. Chen // Molecules. - 2011. - Volume 16(6). - P. 4428-4437. -DOI: 10.3390/molecules16064428

11. Both, S. Extraction of polyphenols from black tea - Conventional and ultrasound assisted extraction / S. Both, F. Chemat, J. Strube // Ultrasonics Sonochemistry. - 2014. - Volume 21(3). - P. 1030-1034. -DOI: 10.1016/j.ultsonch.2013.11.005

12. Kumari, B. Ultrasound-assisted extraction of polyphenols from potato peels: profiling and kinetic modeling / B. Kumari, B.K. Tiwari, M.B. Hossain, D.K. Rai, N.P. Brunton // International Journal of Food Science & Technology. -2017. - Volume 52(6). - P. 1432-1439. - DOI:10.1111/ijfs.13404

13. Sousa, J. Optimization of ultrasound-assisted extraction of polyphenols, tannins and epigallocatechin gallate from barks of Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville bark extracts / J. Sousa, N. Pedroso, L.A.G. Borges, J. Paula, E. Conceicao // Pharmacognosy Magazine. - 2014. - Volume 10(38). - P. S318-S324. - DOI: 10.4103/0973-1296.133287

14. Irakli, M. Optimization of ultrasound-assisted extraction of phenolic compounds: Oleuropein, phenolic acids, phenolic alcohols and flavonoids from olive leaves and evaluation of its antioxidant activities / M. Irakli, P. Chatzopoulou, L. Ekateriniadou // Industrial Crops and Products. - 2018. -Volume 124. - P. 382-388. - DOI:10.1016/j.indcrop.2018.07.070

15. Ghitescu, R.-E. Optimization of ultrasound-assisted extraction of polyphenols from spruce wood bark / R.-E. Ghitescu, I. Volf, C. Carausu, A.-M. Bühlmann, I.A. Gilca, V.I. Popa // Ultrasonics Sonochemistry. - 2015. - Volume 22. - P. 535-541. - DOI:10.1016/j.ultsonch.2014.07.013

16. Goltz, C. Ultrasound-assisted extraction of phenolic compounds from Macela (Achyrolcine satureioides) extracts / C. Goltz, S. Ávila, J.B. Barbieri, L. Igarashi-Mafra, M.R. Mafra // Industrial Crops and Products. - 2018. - Volume 115. - P. 227-234. - DOI:10.1016/j.indcrop.2018.02.013

17. Medina-Torres, N. Ultrasound assisted extraction for the recovery of phenolic compounds from vegetable sources / N. Medina-Torres, T. Ayora-Talavera, H. Espinosa-Andrews, A. Sánchez-Contreras, N. Pacheco // Agronomy. - 2017. - Volume 7, Issue 3. - P. 1-19. - DOI: 10.3390/agronomy7030047

18. Teng, H. Erratum to: Optimization of ultrasonic-assisted extraction of polyphenols, anthocyanins, and antioxidants from raspberry (Rubus coreanus Miq.) using response surface methodology / H. Teng, W.Y. Lee, Y.H. Choi // Food Analytical Methods. - 2014. - Volume 8(2). - P. 539-539. -DOI: 10.1007/s12161 -014-9920-9

19. Machado, A.P.D.F. Pressurized liquid extraction of bioactive compounds from blackberry (Rubus fruticosus L.) residues: a comparison with conventional methods / A.P.D.F. Machado, J.L. Pasquel-Reátegui, G.F. Barbero, J. Martínez // Food Research International. - 2015. - Volume 77. - P. 675-683. -DOI:10.1016/j.foodres.2014.12. A.P.D.F. Machado, 042

20. Machado, A.P.D.F. Recovery of anthocyanins from residues of Rubus fruticosus, Vaccinium myrtillus and Eugenia brasiliensis by ultrasound assisted extraction, pressurized liquid extraction and their combination / A.P.D.F.

Machado, A.L.D. Pereira, G.F. Barbero, J. Martinez // Food Chemistry. - 2017. -Volume 231. - P. 1-10. - DOI:10.1016/j.foodchem.2017.03.060

21. Rosello-Soto, E. High Voltage Electrical Discharges, Pulsed Electric Field, and Ultrasound Assisted Extraction of Protein and Phenolic Compounds from Olive Kernel / E. Rosello-Soto, F.J. Barba, O. Parniakov, C.M. Galanakis, N. Lebovka, N. Grimi, E. Vorobiev // Food Bioprocess Technology. - 2015. -Volume 8. - P. 885-894. - DOI: 10.1007/s11947-014-1456-x

22. Luengo, E. Improving the pressing extraction of polyphenols of orange peel by pulsed electric fields / E. Luengo, I. Alvarez, J. Raso // Innovative Food Science & Emerging Technologies. - 2013. - Volume 17. - P. 79-84. -DOI:10.1016/j.ifset.2012.10.005

23. Corrales, M. Extraction of anthocyanins from grape by-products assisted by ultrasonics, high hydrostatic pressure or pulsed electric fields: a comparison / M. Corrales, S. Toepfl, P. Butz, D. Knorr, B. Tauscher // Innovative Food Science and Emerging Technologies. - 2008. - Volume 9. - P. 85-91.

24. Rahaman, A. Impact of pulsed electric field treatment on drying kinetics, mass transfer, colour parameters and microstructure of plum / A. Rahaman, A. Siddeeg, M.F. Manzoor, X.-A. Zeng, Sh. Ali, Z. Baloch, J. Li, Q.-H. Wen // Journal of Food Sciences and Technologies. - 2019. - Volume 56. -P. 2670-2678. - DOI: 10.1007/s13197-019-03755-0

25. Gavahian, M. Ohmic heating as a promising technique for extraction of herbal essential oils: Understanding mechanisms, recent findings, and associated challenges / M. Gavahian, S. Sastry, R. Farhood, A. Farahnaky // Advances in Food and Nutrition Research. - 2020. - Volume 91. - P. 227-273.

26. El Darra, N. Extraction of polyphenols from red grape pomace assisted by pulsed ohmic heating / N. El Darra, N. Grimi, E. Vorobiev, N. Louka, R. Maroun // Food and Bioprocess Technology. - 2013. - Volume 6. - P. 12811289. - DOI 10.1007/s11947-012-0869-7

27. Li, Z. Recent advances in high voltage electric discharge extraction of bioactive ingredients from plant materials / Z. Li, Y. Fan, J. Xi // Food Chemistry. - 2019. - Volume 277. - P. 246-260. - DOI:10.1016/j.foodchem.2018.10.119

28. El Kantar, S. High voltage electrical discharges combined with enzymatic hydrolysis for extraction of polyphenols and fermentable sugars from orange peels / S. El Kantar, N. Boussetta, H.N. Rajha, R.G. Maroun, N. Louka, E. Vorobiev // Food Research International. - 2018. - Volume 107. - P. 755-762. -DOI:10.1016/j.foodres.2018.01.070

29. Brianceau, S. High voltage electric discharges assisted extraction of phenolic compounds from grape stems: Effect of processing parameters on flavan-3-ols, flavonols and stilbenes recovery / S. Brianceau, M. Turk, X. Vitrac, E. Vorobiev // Innovative Food Science & Emerging Technologies. - 2016. - Volume 35. - P. 67-74. - DOI: https://doi.org/10.1016/jifset.2016.04.006.

30. Xi, J. Continuous extraction of phenolic compounds from pomegranate peel using high voltage electrical discharge / J. Xi, L. He, L.G. Yan // Food Chemistry. - 2017. - Volume 230. - P. 354-361. - DOI: 10.1016/j.foodchem.2017.03.072.

31. Deng, Y. Circulating polyphenols extraction system with highvoltage electrical discharge: Design and performance evaluation / Y. Deng, T. Ju, J. Xi // ACS Sustainable Chemistry & Engineering. - 2018. - DOI: 10.1021/ acssuschemeng.8b03827

32. Duba, K. S. Extraction of polyphenols from grape skins and defatted grape seeds using subcritical water: Experiments and modeling / K.S. Duba, A.A. Casazza, H.B. Mohamed, P. Perego, L. Fiori // Food and Bioproducts Processing. -2015. - Volume 94. - P. 29-38. - DOI:10.1016/j.fbp.2015.01.001

33. Wang, W. Antioxidant Activity and Total Polyphenols Content of Camellia Oil Extracted by Optimized Supercritical Carbon Dioxide / W. Wang, S. Han, Z. Jiao, J. Cheng, J. Song // Journal of the American Oil Chemists' Society. -2019. - Volume 96. - P. 1275-1289. - DOI:10.1002/aocs.12285

34. Strizincová, P. Spruce bark—a source of polyphenolic compounds: Optimizing the operating conditions of supercritical carbon dioxide extraction / P. Strizincová, A. Ház, Z. Burcová, J. Feranc, F. Kreps, I. Surina, M. Jablonsky // Molecules. - 2019. - Volume 24, Issue 22, Article ID 4049. - P. 1-15. -DOI: 10.3390/molecules24224049

35. Grasel, F. dos S. Ultraviolet spectroscopy and chemometrics for the identification of vegetable tannins / F. dos S. Grasel, M.F. Ferrao, C.R. Wolf // Industrial Crops and Products. - 2016. - Volume 91. - P. 279-285. -DOI:10.1016/j.indcrop.2016.07.022

36. Pardo-Mates, N. Characterization, classification and authentication of fruit-based extracts by means of HPLC-UV chromatographic fingerprints, polyphenolic profiles and chemometric methods / N. Pardo-Mates, A. Vera, S. Barbosa, M. Hidalgo-Serrano, O. Núñez, J. Saurina, S. Hernández-Cassou, L. Puignou // Food Chemistry. - 2017. - Volume 221. - P. 29-38. -DOI:10.1016/j.foodchem.2016.10.033

37. Musci, M. Optimization and validation of Folin-Ciocalteu method for the determination of total polyphenol content of Pu-erh tea / M. Musci, S. Yao // International Journal of Food Sciences and Nutrition. - 2017. - Volume 68, Issue 8. - P. 913-918. - DOI: 10.1080/09637486.2017.1311844

38. Barlocher, F. Total Phenolics / F. Barlocher M.A.S. Gra?a // Methods to Study Litter Decomposition / F. Barlocher, M.Gessner, M. Gra?a. - Springer, 2020. - 157-161 p. - DOI: 10.1007/978-3-030-30515-4_18

39. Hudz, N. Application of the Folin-Ciocalteu method to the evaluation of Salvia sclarea extracts / N. Hidz, O. Yezerska, M. Shanaida, V. Horcinová Sedlácková, P.P. Wieczorek // Pharmacia. - 2019. - Volume 66, Issue 4. - P. 2092015.

40. Kanmaz, N. Determination of total antioxidant capacity of Cynara scolymus L. (globe artichoke) by using novel nanoparticle-based ferricyanide/Prussian blue assay / N. Kanmaz, A. Uzer, J. Hizal, R. Apak //

Talanta. - 2020. - Volume 216, Article ID 120960. - P. 1-7. -D01:10.1016/j.talanta.2020.120960

41. Stevanato, R Phenolic content and antioxidant properties of fermenting musts and fruit and vegetable fresh juices / R. Stevanato, S. Fabris, M. Bertelle, E. Gregoris, F. Momo // Acta Alimentaria. - 2009. - Volume 38. - P. 193-203.

42. Matic, P. Validation of spectrophotometric methods for the determination of total polyphenol and total flavonoid content / P. Matic, M. Sabljic, L. Jakobek // Journal of AOAC International. - 2017. - Volume 100, Issue 6. - P. 1795-1803. - DOI: 10.5740/jaoacint.17-0066

43. Chen, M.H. Concentrations of oligomers and polymers of proanthocyanidins in red and purple rice bran and their relationships to total phenolics flavonoids, antioxidant capacity and whole grain color / M.H. Chen, A.M. McClung, C.J. Bergman // Food Chemistry. - 2016. - Volume 208. - P. 279-287

44. Domínguez-Rodríguez, G. Strategies for the extraction and analysis of non-extractable polyphenols from plants / G. Domínguez-Rodríguez, M.L. Marina, M. Plaza // Journal of Chromatography A. - 2017. - Volume 1514. - P. 1-15. -DOI: 10.1016/j.chroma.2017.07.066

45. Herald, T.J. High-throughput micro-plate HCl-vanillin assay for screening tannin content in sorghum grain / T.J. Herald, P. Gadgil, R. Perumal, S.R. Bean, J.D. Wilson // Journal of the Science of Food and Agriculture. - 2014. -Volume 94, Issue 10. - P. 2133-2136. - D0I:10.1002/jsfa.6538

46. Wang, Y. Influence of degree-of-polymerization and linkage on the quantification of proanthocyanidins using 4-dimethylaminocinnamaldehyde (DMAC) assay / Y. Wang, A.P. Singh, W.J. Hurst, J.A. Glinski, H. Koo, N. Vorsa // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2016. - Volume 64, Issue 11. - P. 2190-2199. - D0I:10.1021/acs.jafc.5b05408

47. United States Pharmacopeia 40 - the National Formulary 35. Volume 1. -New York: United Book Press, 2017. - 2389 p.

48. Rebaya, A. Total Phenolic, Total Flavonoid, Tannin Content, and Antioxidant Capacity of Halimium halimifolium (Cistaceae) / A. Rebaya, S.I. Belghith, B. Baghdikian, V.M. Leddet, F. Mabrouki, E. Olivier, J.K. Cherif, M.T. Ayadi // Journal of Application in Pharmaceutical Science. - 2015. - Volume 1, Issue 1. - P. 052-057.

49. Falcao, L. Vegetable Tannins Used in the Manufacture of Historic Leathers / L. Falcao, M. Araujo // Molecules. - 2018. - Volume 23, Issue 5. - P. 1081. - DOI: 10.3390/molecules23051081

50. Kishore, N. Isolation of flavonoids and flavonoid glycosides from Myrsine africana and their inhibitory activities against mushroom tyrosinase / N. Kishore, D. Twilley, A. Blom van Staden, P. Verma, B. Singh, G. Cardinali, D. Kovacs, M. Picardo, V. Kumar, N. Lall // Journal of Natural Products. - 201. -2018. - Volume 81, Issue 1. - P. 49-56. - D0I:10.1021/acs.jnatprod.7b00564

51. John, S.S.P. Phytochemical profile and thin layer chromatographic studies of Daucus carota peel extracts / S.S.P. John, S.J.P.A. Monica // International Journal of Food Science and Nutrition. - 2017. - Volume 2, Issue 1. - P. 23-26.

52. Misra, A. A validated reversed-phase over-pressured layer chromatography-ultraviolet method for the quantification and optimum recovery of gallic acid in Annona muricata L. / A. Misra, S. Srivastava, A.K. Singh Rawat // JPC - Journal of Planar Chromatography - Modern TLC. - 2016. - Volume 29, Issue 2. - P. 127-131. - DOI: 10.1556/1006.2016.29.2.6

53. Polak, B. P-Cyclodextrin as the mobile phase component for separation of some DNS-amino acid enantiomers with HPTLC and PPEC / B. Polak, P. Garbacz // Current Analytical Chemistry. - 2015. - Volume 11. - P. 6877.

54. Polak, B. Comparison of phenolic compound separations by HPTLC and PPEC with SDS as the mobile phase component / B. Polak, A. Traczuk, M. Kaminska, M. Kozyra // Journal of Analytical Methods in Chemistry. - 2019. -Volume 2019, Article ID 645340. - P. 1-15. - D0I:10.1155/2019/6845340

55. Frommenwiler, D. A. Comprehensive HPTLC fingerprinting as a tool for a simplified analysis of purity of ginkgo products / D.A. Frommenwiler, A. Booker, R. Vila, M. Heinrich, E. Reich, S. Canigueral // Journal of Ethnopharmacology. - 2019. - Volume 243, Article ID 112084. - P.1-10. - DOI: 10.1016/j.jep.2019.112084

56. Jug, U. HPTLC-densitometric and HPTLC-MS methods for analysis of flavonoids / U. Jug, V. Glavnik, E. Kranjc, I. Vovk // Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies. - 2018. - Volume 41, Issue 6. - P. 329341. - DOI: 10.1080/10826076.2018.1448690

57. Giusti, F. Determination of fourteen polyphenols in pulses by high performance liquid chromatography-diode array detection (HPLC-DAD) and correlation study with antioxidant activity and colour / F. Giusti, G. Caprioli, M. Ricciutelli, S. Vittori, G. Sagratini // Food Chemistry. - 2017. - Volume 221. - P. 689-697. - DOI: 10.1016/j.foodchem.2016.11.118

58. Zhang, X.-H. Fast HPLC-DAD quantification of nine polyphenols in honey by using second-order calibration method based on trilinear decomposition algorithm / X.-H. Zhang, H.-L. Wu, J.-Y. Wang, D.-Z. Tu, C. Kang, J. Zhao, R.-Q. Yu // Food Chemistry. - 2013. - Volume 138, Issue 1. - P. 62-69. -DOI:10.1016/j.foodchem.2012.10.033

59. Zhong, L. Characterization of polyphenols in Australian sweet lupin (Lupinus angustifolius) seed coat by HPLC-DAD-ESI-MS/MS / L. Zhong, G. Wu, Z. Fang, M.L. Wahlqvist, J.M. Hodgson, M.W. Clarke, S.K. Johnson // Food Research International. - 2018. - Volume 116. - P. 1153-1162. -DOI:10.1016/j.foodres.2018.09.061

60. Klampfl, C.W. Direct ionization methods in mass spectrometry: An overview / C.W. Klampfl, M. Himmelsbach // Analytica Chimica Acta. - 2015. -Volume 890. - P. 44-59. - DOI:10.1016/j.aca.2015.07.012

61. Trimpin, S. Combining novel and traditional ionization methods for mass spectrometry for more comprehensive analyses / S. Trimpin, E.D. Inutan,

C.N. McEwen, A.K. Meher, S. Karki, S. Madarshahian, M.A. Fenner, D.D. Msrshall // The Column. - 2018. - Volume 16, Issue 1. - P. 12-17.

62. Boesl, U. Time-of-flight mass spectrometry: Introduction to the basics / U. Boesl // Mass Spectrometry Reviews. - 2016. - Volume 36, Issue 1. - P. 86109. - D0I:10.1002/mas.21520

63. Lin, H. Comparative analysis of chemical constituents of Moringa oleifera leaves from China and India by ultra-performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time-of-flight mass spectrometry / H. Lin, H. Zhu, J. Tan, H. Wang, Z. Wang, P. Li, C. Zhao, J. Liu // Molecules. - 2019. - Volume 24, Issue 5, Article ID 942. - P. 1-25. - DOI: 10.3390/molecules24050942

64. Tang, G. Determination of phenolic acids in extra virgin olive oil using supercritical fluid chromatography coupled with single quadrupole mass spectrometry / G. Tang, Y. Huang, T. Zhang, Q. Wang, J. Crommen, M. Fillet, Z. Jiang // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2018. - Volume 157. - P. 217-225. - DOI: 10.1016/j.jpba.2018.05.025

65. Zhao, D. Development and validation of an ultra-high performance liquid chromatography/triple quadrupole mass spectrometry method for analyzing microbial-derived grape polyphenol metabolites / D. Zhao, B. Yuan, E. Carry, G.M. Pasinetti, L. Ho, J. Faith, Q. Wu // Journal of Chromatography B. - 2018. -Volume 1099. - P. 34-45. - DOI:10.1016/j.jchromb.2018.09.014

66. Zhang, Y. Simultaneous determination of 16 phenolic constituents in Spatholobi caulis by high performance liquid chromatography/electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry / Y. Zhang, L. Guo, L. Duan, X. Dong, P. Zhou, E.-H. Liu, P. Li // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2015. - Volume 102. - P. 110-118. - DOI:10.1016/j.jpba.2014.09.006

67. Schmidt, J. Negative ion electrospray high-resolution tandem mass spectrometry of polyphenols / J. Schmidt // Journal of Mass Spectrometry. - 2015. - Volume 51, Issue 1. - P. 33-43. - DOI:10.1002/jms.3712

68. Achaintre, D. Differential isotope labeling of 38 dietary polyphenols and their quantification in urine by liquid chromatography electrospray ionization

tandem mass spectrometry / D. Achaintre, A. Buleté, C. Cren-Olivé, L. Li, S. Rinaldi, A. Scalbert // Analytical Chemistry. - 2016. - Volume 88, Issue 5. - P. 2637-2644. - D0I:10.1021/acs.analchem.5b03609

69. Cádiz-Gurrea, M. de la L. Bioassay-guided purification of Lippia citriodora polyphenols with AMPK modulatory activity / M. de la L. Cádiz-Gurrea, M. Olivares-Vicente, M. Herranz-López, D. Arraez-Roman, S. Fernández-Arroyo, V. Micol, A. Segura-Carretero // Journal of Functional Foods. - 2018. -Volume 46. - P. 514-520. - D0I:10.1016/j.jff.2018.05.026

70. Aguilar-Zárate, P. Characterisation of pomegranate-husk polyphenols and semi-preparative fractionation of punicalagin / P. Aguilar-Zárate, J.E. Wong-Paz, M. Michel, J. Buenrostro-Figueroa, H.R. Díaz, J.A. Ascacio, C.N. Aguilar // Phytochemical Analysis. - 2017. - Volume 28, Issue 5. - P. 433-438. -D0I:10.1002/pca.2691

71. De Souza, L. A. Structural analysis of flavonoids in solution through DFT 1 H NMR chemical shift calculations: Epigallocatechin, Kaempferol and Quercetin / L.A. De Souza, W.M.G. Tavares, A.P.M. Lopes, M.M. Soeiro, W.B. De Almeida // Chemical Physics Letters. - 2017. - Volume 676. - P. 46-52. -D0I:10.1016/j.cplett.2017.03.038

72. Mihaleva, V.V. MetIDB: a publicly accessible database of predicted and experimental 1h nmr spectra of flavonoids / V.V. Mihaleva, T.A.H. te Beek, F. van Zimmeren, S. Moco, R. Laatikainen, M. Niemitz, J. Vervoort // Analytical Chemistry. - 2013. - Volume 85, Issue 18. - P. 8700-8707. -D0I:10.1021/ac4016837

73. Cao, M. A 13C-NMR study on the 1,3-dimethylolurea-phenol co-condensation reaction: A model for amino-phenolic co-condensed resin synthesis / M. Cao, T. Li, J. Liang, Z. Wu, X. Zhou, G. Du // Polymers. - 2016. - Volume 8. -P. 1-15.

74. Chen, J. Structural elucidation and antioxidant activity evaluation of key phenolic compounds isolated from longan (Dimocarpus longan Lour.) seeds /

J. Chen, Y. Xu, Z. Ge, W. Zhu, Z. Xu, C. Li // Journal of Functional Foods. -2015. - Volume 17. - P. 872-880. - D01:10.1016/j.jff.2015.06.028

75. Martí, R. Simultaneous determination of main phenolic acids and flavonoids in tomato by micellar electrokinetic capillary electrophoresis / R. Martí, M. Valcárcel, J.M. Herrero-Martínez, J. Cebolla-Cornejo, S. Roselló // Food Chemistry. - 2017. - Volume 221. - P. 439-446. - DOI: 10.1016/j.foodchem.2016.10.105

76. §anli, S. Development and validation of a green capillary electrophoretic method for determination of polyphenolic compounds in red wine samples / S. §anli, N. §anli, S.A. Ozkan, C. Lunte // Chromatographia. - 2016. -Volume 79. - P. 1351-1358. - DOI: 10.1007/s10337-016-3147-4

77. Pei, Y.-F. Comparison and identification for rhizomes and leaves of Paris yunnanensis based on fourier transform mid-infrared spectroscopy combined with chemometrics / Y.-F. Pei, Q.-Z. Zhang, Z.-T. Zuo, Y.-Z. Wang // Molecules. - 2018. - Volume 23, Issue 12, Article ID 3343. - P. 1-16. - DOI: 10.3390/molecules23123343

78. Mees, C. Identification of coffee leaves using FT-NIR spectroscopy and SIMCA / C. Mees, F. Souard, C. Delporte, E. Deconinck, P. Stoffelen, C., Stévigny, C., J.-M. Kauffmann, K. De Braekeleer, K. // Talanta. - 201. - Volume 177. - P. 4-11. - DOI: 10.1016/j.talanta.2017.09.056

79. Hazarika, A.K. Quality assessment of fresh tea leaves by estimating total polyphenols using near infrared spectroscopy / A.K. Hazarika, S. Chanda, S. Sabhapondit, S. Sanyal, P. Tamyli, S. Tasrin, D. Sing, B. Tudu, R. Bandyopadhyay // Journal of Food Science and Technology. - 2018. - Volume 55. - P. 4867-4876. - DOI: 10.1007/s 13197-018-3421-6

80. Li, W. Rapid quantification of phenolic acids in radix Salvia miltrorrhiza extract solutions by FT-NIR spectroscopy in transflective mode / W. Li, H. Qu // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2010. - Volume 52. - P. 425-431.

81. Belscak-Cvitanovic, A. Integrated approach for bioactive quality evaluation of medicinal plant extracts using HPLC-DAD, spectrophotometric, near infrared spectroscopy and chemometric techniques / A. Belscak-Cvitanovic, D. Valinger, M. Benkovic, A.J. Tusek, T. Jurina, D. Komes, J. Gajdos Kljusuric // International Journal of Food Properties. - 2017. - Volume 20(sup3). - P. S2463-S2480. - DOI:10.1080/10942912.2017.1373122

82. Mazurek, S. Determination of antioxidant activity and polyphenols content in chips by Raman and IR spectroscopy / S. Mazurek, R. Szostak, A. Kita, A.Z. Kucharska, A. Sokol-L^towska, K. Hamouz // Food Analytical Methods. -2017. - Volume 10. - P. 3964-3971. - DOI: 10.1007/s12161-017-0972-5

83. Mazurek, S. Quantification of active ingredients in Potentilla tormentilla by Raman and infrared spectroscopy / S. Mazurek, I. Fecka, M. W?glinska, R. Szostak // Talanta. - 2018. - Volume 189. - P. 308-314. - DOI: 10.1016/j.talanta.2018.07.012.

84. Chen, D.-D. Raman spectroscopy in quality control of Chinese herbal medicine / D.-D. Chen, X.-F. Xie, H. Ao, J.-L. Liu, C. Peng // Journal of the Chinese Medical Association. - 2017. - Volume 80, Issue 5. - P. 288-296. -DOI: 10.1016/j.jcma.2016.11.009.

85. Tugizimana, F. Plant metabolomics: A new frontier in phytochemical analysis / F. Tugizimana, L. Piater, I. Dubery // South African Journal of Science. - 2013. - Volume 109, Issue 5-6. - P. 1-11.

86. Hall, L.M. Development of a reverse phase HPLC retention index model for nontargeted metabolomics using synthetic compounds / L.M. Hall, D.W. Hill, K. Bugden, S. Cawley, L.-H. Hall, M.-H. Chen, D.F. Grant // Journal of Chemical Information and Modeling. - 2018. - Volume 58, Issue 3. - P. 591604. - DOI:10.1021/acs.jcim.7b00496

87. Beale, D.J. Review of recent developments in GC-MS approaches to metabolomics-based research / D.J. Beale, F.R. Pinu, K.A. Kouremenos, M.M. Poojary, V.K. Narayani, B.A. Boughton, K. Kanojia, S. Dayalan, O.A.H. Jones,

D.A. Dias // Metabolomics. - 2018. - Volume 14, Article ID 152. - P. 1-31. -DOI: 10.1007/s11306-018-1449-2

88. Emwas, A.-H. NMR spectroscopy for metabolomics research / A.-H. Emwas, R. Roy, R.T. McKay, L. Tenori, E. Saccenti, G.A.N. Gowda, D. Raftery, F. Alahmari, L. Jaremko, M. Jaremko, D.S. Wishart // Metabolites. - 2019. -Volume 9, Issue 7, Article ID 123. - P. 1-39. - DOI: 10.3390/metabo9070123

89. Li, B. NOREVA: normalization and evaluation of MS-based metabolomics data / B. Li, J. Tang, Q. Yang, S. Li, X. Cui, Y. Li, Y. Chen, W. Xue, X. Li, F. Zhu // Nucleic Acids Research. - 2017. - Volume 45, Issue W1. - P. W162-W170. - DOI: 10.1093/nar/gkx449

90. Mukherjee, P.K. Metabolomics of medicinal plants-a versatile tool for standardization of herbal products and quality evaluation of ayurvedic formulations / P.K. Mukherjee, R.K. Harwansh, S. Bshsdur, S. Biswas, L.N. Kuchibhatia, S.D. Tetali, A.S. Raghavendra // Current Science. - 2016. - Volume 111, Issue 10. - P. 1624-1630.

91. Nguyen, H.T. A 1H NMR-based metabolomics approach to evaluate the geographical authenticity of herbal medicine and its application in building a model effectively assessing the mixing proportion of intentional admixtures: A case study of Panax ginseng / H.T. Nguyen, D.-K. Lee, Y.-G. Choi, J.-E. Min, S.J. Yoon, Y.-H. Yu, J. Lim, J.L.Sung, W. Kwon, J.H. Park // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2016. - Volume 124. - P. 120-128. -DOI:10.1016/j.jpba.2016.02.028

92. Ullah, N. Comparative metabolite profiling of drought stress in roots and leaves of seven Triticeae species / N. Ullah, M. Yuce, Z. Neslihan Ozturk Gok?e, H. Budak // BMC Genomics. - 2017. - Volume 18, Issue 1. - P. 1-12. -DOI: 10.1186/s 12864-017-4321 -2

93. Saeidnia, S. Reverse pharmacognosy and reverse pharmacology; two closely related approaches for drug discovery development / S. Saeidnia, A.R. Gohari, A. Manayi // Current Pharmaceutical Biotechnology. - 2016. - Volume 17, Issue 11. - P. 1016-1022.

94. Лагунин, А.А. Возможности компьютерной оценки скрытого потенциала фитокомпонентов лекарственных растений из традиционной индийской медицины Аюрведа / А.А. Лагунин, Д.С. Дружиловский, А.В. Рудик, Д.А. Филимонов, Д. Гаванде, К. Суреш, В.В. Поройков // Биомедицинская химия. - 2015. - T. 61, № 2. - С. 286-297.

95. Орлова А.А. Использование подходов метаболомике в анализе лекарственных растений и фитопрепаратов / А.А. Орлова, Й. Стругар, О.Ю. Штарк В.А. Жуков, В.Г. Лужанин, М.Н. Повыдыш // Разработка и регистрация. - 2021. - Том 10, №1 - С. 78-86.

96. Abdel-Farid, I.B. Metabolomic profiling and antioxidant activity of some Acacia species / I.B. Abdel-Farid, M.G. Sheded, E.A. Mohamed // Saudi Journal of Biological Sciences. - 2014. - Volume 21, Issue 5. - P. 400-408. -D01:10.1016/j.sjbs.2014.03.005

97. Tang, D. Metabolomic analysis of the polyphenols in germinating mung beans (Vigna radiata) seeds and sprouts / D. Tang, Y. Dong, N. Guo, L. Li, H. Ren // Journal of the Science of Food and Agriculture. - 2013. - Volume 94, Issue 8. - P. 1639-1647. - D0I:10.1002/jsfa.6471

98. Berkov, S. Metabolic and chemotaxonomical stidies in some Geum (Rosaceae) species / S. Berkov, N. Kasabova, D. Pavlova, S. Tonkov // Phytologia Balcanica. - 2017. - Volume 23, Issue 1. - P. 7-16.

99. Zhang, Y. Antioxidant activities of leaf extract of Salvia miltiorrhiza Bunge and related phenolic constituents / Y. Zhang, X. Li, Z. Wang // Food Chemical and Toxicology. -2010. - Volume 48, Issue 10. - P. 2656-2662.

100. Loizzo, M.R. In vitro antioxidant and antiproliferative activities of nine Salvia species / M.R. Loizzo, M. Abouali, P. Salehi, A. Sonboli, M. Kanani, F. Menichini, R. Tundis // Natural Products Research. - 2014. - Volume 28. - P. 2278-2285.

101. Hussain, T. 0xidative Stress and Inflammation: What Polyphenols Can Do for Us? / T. Hussain, B. Tan, Y. Yin, F. Blachier, M.C.B. Tossou, N. Rahu

// Oxidative Medicine and Cellular Longevity. - 2016. - Article ID 7432797. - P. 1-9. - DOI: 10.1155/2016/7432797

102. Adomakobonsu, A.G. Antioxidant activity of rosmarinic acid and its principal metabolites in chemical and cellular systems: Importance of physico-chemical characteristics /A.G. Adomakobonsu, S.L. Chan, M. Pratten, J.R. Fry // Toxicology In Vitro. - 2017. - Volume 40. - P. 248-255.

103. Kolac, U.K. The Anti-inflammatory and antioxidant effects of Salvia officinalis on lipopolysaccharide-induced inflammation in rats / U.K. Kolac, M.C. Ustuner, N. Tekin, D. Ustuner, E. Colak, E. Entok // Journal of Medicinal Food. -2017. - Volume 20. - P. 1193-1200.

104. Wang, J. Biosynthesis, chemistry, and pharmacology of polyphenols from Chinese Salvia species: A review / J. Wang, J. Xu, X. Gong, M. Yang, C. Zhang, M. Li // Molecules. - 2019. - Volume 24, Issue 1, Article ID 155. - P. 123. - DOI:10.3390/molecules24010155

105. Miranda, A.R. Pharmacology and toxicology of polyphenols with potential as neurotropic agents in non-communicable diseases / A.R. Miranda, C. Albrecht, M.V. Cortez, E.A. Soria // Current Drug Targets. - 2018. - Volume 19, Issue 2. - P. 97-110. - DOI: 10.2174/1389450117666161220152336

106. Du, G. Polyphenols: Potential source of drugs for the treatment of ischaemic heart disease / G. Du, L. Sun, R. Zhao, L. Du, J. Song, L. Zhang, J. Zhang // Pharmacology & Therapeutics. - 2016. - Volume 162. - P. 23-34. -DOI:10.1016/j.pharmthera.2016.04.008

107. Abbas, M. Natural polyphenols: An overview / M. Abbas, F. Saeed, F.M. Anjum, M. Afzaal, T. Tufail, M.S. Bashir, A. Ishtiaq, S. Hussain, H.A.R. Suleria // International Journal of Food Properties. - 2016. - Volume 20, Issue 8. -P. 1689-1699. - DOI:10.1080/10942912.2016.1220393

108. Beretta, G. Anti-ischemic activity and endothelium-dependent vasorelaxant effect of hydrolysable tannins from the leaves of Rhus coriaria (Sumac) in isolated rabbit heart and thoracic aorta / G. Beretta, G. Rossoni, N.A.

Santagati, R.M. Facino // Planta Medica. - 2009. - Volume 75, Issue 14. - P. 1482-1488.

109. Zhu, Y. Purified anthocyanin supplementation improves endothelial function via NO-cGMP activation in hypercholesterolemic individuals / Y. Zhu, M. Xia, Y. Yang, F. Liu, Z. Li, Y. Hao, Y., M. Mi, T. Jin, W. Ling // Clinical Chemistry. - 2011. - Volume 57, Issue 11. - P. 1524-1533. -DOI: 10.1373/clinchem.2011.167361

110. Crescente, M. Interactions of gallic acid, resveratrol, quercetin and aspirin at the platelet cyclooxygenase-1 level-functional and modelling studies / M. Crescente, G. Jessen, S. Momi, H.-D. Holtje, P. Gresele, C. Cerletti, G. de Gaetano // Thrombosis and Haemostasis. - 2009. - Volume 102, Issue 2. - P. 336-346.

111. Fan, H.Y. Antiplatelet and antithrombotic activities of salvianolic acid A / H.Y. Fan, F.H. Fu, M.Y. Yang, H. Xu, A.H. Zhang, K. Li // Thrombosis Research. - 2010. - Volume 126, Issue 1. - P. e17-e22.

112. Jiang, F. Cytoprotection by natural and synthetic polyphenols in the heart: novel mechanisms and perspectives / Jiang, F., Chang, C. W., & Dusting, G. J. // Current Pharmaceutical Design. - 2010. - Volume 16, Issue 37. - P. 41034112.

113. Cao, Y.G. Metabolism of protocatechuic acid influences fatty acid oxidation in rat heart: new anti-angina mechanism implication / Y.G. Cao, L. Zhang, C. Ma, B.B. Chang, Y.C. Chen, Y.Q. Tang, X.D. Liu, X.Q. Liu // Biochemical Pharmacology. - 2009. - Volume 77, Issue 6. - P. 1096-1104.

114. Zhou, Z. Protocatechuic aldehyde inhibits hepatitis B virus replication both in vitro and in vivo / Z. Zhou, Y. Zhang, X.R. Ding, S.H. Chen, J. Yang, X.J. Wang, G.L. Jia, H.S. Chen, X.C. Bo, S.Q. Wang // Antiviral Research. - 2007. -Volume 74. - P. 59-64.

115. Chung, Y.C. Magnesium lithospermate B and rosmarinic acid, two compounds present in Salvia miltiorrhiza, have potent antiviral activity against enterovirus 71 infections / Y.C. Chung, F.C. Hsieh, Y.J. Lin, T.Y. Wu, C.W. Lin,

C.T. Lin, N.Y. Tang, T.R. Jinn // European Journal of Pharmacology. - 2015. -Volume 755. - P. 127-133.

116. Makau, J.N. Antiviral activity of peanut (Arachis hypogaea L.) skin extract against human influenza viruses / J.N. Makau, K. Watanabe, M.M.D. Mohammed, N. Nishida // Journal of Medicinal Food. - 2018. - Volume 21, Issue 8. - P. 777-784. - D01:10.1089/jmf.2017.4121

117. Denaro, M. Antiviral activity of plants and their isolated bioactive compounds: An update / M. Denaro, A. Smeriglio, D. Barreca, C. De Francesco, C. Occhiuto, G. Milano, D. Trombetta // Phytotherapy Research. - 2019. - P. 1-27. - DOI: 10.1002/ptr.6575.

118. Zhang, X.-N. Epigallocatechin-3-gallate enhances tomato resistance to tobacco mosaic virus by modulating RB0H1-dependent H202 signaling / X.-N. Zhang, Y.-W.-K. Liao, X.-R. Wang, L. Zhang, G.J. Ahammed, Q.-Y. Li, X. Li // Plant Physiology and Biochemistry. - 2020. - Volume 150. - P. 263-269. -D0I:10.1016/j.plaphy.2020.03.008

119. Chibane, L. B. Plant antimicrobial polyphenols as potential natural food preservatives / L.B. Chibane, P. Degraeve, H. Ferhout, J. Bouajila, N. Oulahal // Journal of the Science of Food and Agriculture. - 2019. - Volume 99, Issue 4. -P.1457-1474. - D0I:10.1002/jsfa.9357

120. Musarra-Pizzo, M. (2019). The antimicrobial and antiviral activity of polyphenols from almond (Prunus dulcis L.) skin / M. Musarra-Pizzo, G. Ginestra, A. Smeriglio, R. Pennisi, M.T. Sciortino, G. Mandalari // Nutrients. - 2019. -Volume 11, Issue 10. - P. 2355. - D0I:10.3390/nu11102355.

121. Álvarez-Martínez, F.J. Antimicrobial capacity of plant polyphenols against gram-positive bacteria: A comprehensive review / F.J. Álvarez-Martínez, E. Barrajón-Catalán, J.A. Encinar, J.C. Rodríguez-Díaz, V. Micol // Current Medicinal Chemistry. - 2020. - Volume 27, Issue 15. - P. 2576-2606. - D0I: 10.2174/0929867325666181008115650

122. Karygianni, L. Natural antimicrobials and oral microorganisms: a systematic review on herbal interventions for the eradication of multispecies oral

biofilms / L. Karygianni, A. Al-Ahmad, A. Argyropoulou, E. Hellwig, A.C. Anderson, A.L. Skaltsounis // Frontiers in Microbiology. - 2016. - Volume 6, Article ID 1529. - P. 1-17. - D01:10.3389/fmicb.2015.01529.

123. Garcia, C.S.C. Pharmacological perspectives from Brazilian Salvia officinalis (Lamiaceae): antioxidant, and antitumor in mammalian cells / C.S.C. Garcia, C. Menti, A.P.F. Lambert, T. Barcellos, S. Moura, C. Calloni, C.S. Branko, M. Salvador, M. Roesch-Ely, J.A.P. Henriques // Anais Da Academia Brasileira de Ciências. - 2016. - Volume 88, Issue 1. - P. 281-292. - D0I:10.1590/0001-3765201520150344

124. Gopalakrishnan, A. Anticarcinogenesis by dietary phytochemicals: cytoprotection by Nrf2 in normal cells and cytotoxicity by modulation of transcription factors NF-kB and AP-1 in abnormal cancer cells / A. Gopalakrishnan, A.-N. Tony Kong // Food and Chemical Toxicology. - 2008. -Volume 46. - P. 1257-1270.

125. Mileo, A.M. Polyphenols as modulator of oxidative stress in cancer disease: new therapeutic strategies / A.M. Mileo, S. Miccadei // Oxidative Medicine and Cellular Longevity. - 2016. - Article ID 6475624. - P. 1-17. -DOI: 10.1155/2016/6475624

126. Liu, X. Salvianolic acids from antithrombotic traditional chinese medicine Danshen are antagonists of human P2Y 1 and P2Y 12 receptors / X. Liu, Z.G. Gao, Y. Wu, R.C. Stevens, K.A. Jacobson, S. Zhao // Scientific Report. -2018. - Volume 8, Article ID 8084. - P. 1-9.

127. Lu, Y. Inhibitory effect of caffeic acid on ADP-induced thrombus formation and platelet activation involves mitogen-activated protein kinases / Y. Lu, Q. Li, Y.Y. Liu, K. Sun, J.Y. Fan, C.S. Wang, J.Y. Han // Scientific Report. -2015. - Volume 5, Article ID 13824. - P. 1-13.

128. Yu, C. Effects of Danshensu on platelet aggregation and thrombosis: in vivo arteriovenous shunt and venous thrombosis models in rats / C. Yu, D. Qi, W. Lian, Q.Z. Li, H.J. Li, H.Y. Fan // PLoS ONE. - 2014. - Volume 9, Issue 11, Article ID e110124. - P. 1-9.

129. Zeng, W. Inhibition of HMGB1 release via salvianolic acid B-mediated SIRT1 up-regulation protects rats against non-alcoholic fatty liver disease / W. Zeng, W. Shan, L. Gao, D. Gao, Y. Hu, G. Wang, N. Zhang, Z. Li, X. Tian, W. Xu, J. Peng, X. Ma, J, Yao // Scientific Report. - 2015. - Volume 5, Article ID 16013. - P. 1-13.

130. Bahadoran, Z. Effect of broccoli sprouts on insulin resistance in type 2 diabetic patients: a randomized double-blind clinical trial / Z. Bahadoran, M. Tohidi, P. Nazeri, M. Mehran, F. Azizi, P. Mirmiran // International Journal of Food Sciences and Nutrition. - 2012. - Volume 63. - P. 767-771.

131. Hanhineva, K. Impact of dietary polyphenols on carbohydrate metabolism / K. Hanhineva, R. Torronen, I. Bondia-Pons, J. Pekkinen, M. Kolehmainen, H. Mykkanan, K. Poutanen // International Journal of Molecular Science. - 2010. - Volume 11. - P. 1365-1402.

132. Gok, D.K. Protective role of rosmarinic acid on amyloid beta 42-induced echoic memory decline: Implication of oxidative stress and cholinergic impairment / D.K. Gok, E. Hidisoglu, G.A. Ocak, H. Er, A.D. Acun, P. Yargicoglu // Neurochemistry International. - 2018. - Volume 118. - P. 1-13.

133. Wang, Y.H. Protocatechualdehyde prevents methylglyoxal-induced mitochondrial dysfunction and AGEs-RAGE axis activation in human lens epithelial cells / Y.H. Wang, Y.P. Han, H.T. Yu, X.P. Pu, G.H. Du // European Journal of Pharmacology. - 2014. - Volume 738. - P. 374-383

134. Qi, H.P. Preventive effect of danshensu on selenite-induced cataractogenesis in cultured rat lens / H.P. Qi, S.Q. Wei, L.Q. Zhang, X.C. Gao, N.N. Yu, S. Bi, H. Cui // Clinical and Experimental Ophthalmology. - 2013. -Volume 41. - P. 172-179.

135. Zhang, D.-H. In silico screening of Chinese herbal medicines with potential to direct inhibit 2019 novel coronavirus / D.-H. Zhang, K.-L. Wu, X. Zhang, S.-Q. Deng, B. Peng // Journal of Integrative Medicine. - 2020. - Volume 18. - P. 152-158. - DOI: https://doi.org/10.1016/jjoim.2020.02.005

136. Mrid, R.B. In silico screening of Moroccan medicinal plants with ability to directly inhibit the novel coronavirus, SARS-CoV-2 / R.B. Mrid, N. Bouchmaa, I. Kabach, M. Sobeh, A. Zyad, M. Nhiri, A. Yarsi // Research Square. - 2020. - Preprint. - P. 1-29.

137. Zengin, G. Combining in vitro, in vivo and in silico approaches to evaluate nutraceutical potentials and chemical fingerprints of Moltkia aurea and Moltkia coerulea / G. Zengin, R. Ceylan, J. Katanic, A. Mollica, A. Aktumsek, T. Boroja, S. Matic, V. Mihailovic, S. Stanic, Z. Aumeeruddy-Elalfi, M.A. Yilmaz, M.F. Mahomoodally // Food and Chemical Toxicology. - 2017. - Volume 107. -P. 540-553. - D0I:10.1016/j.fct.2017.04.004

138. Sonvane, S. In silico analysis of polyphenols and flavonoids for design of human Nav1.7 inhibitors / S. Sonvane, P. Choudhari, O. Bhusnuare // Journal of Biomolecular Structure and Dynamics. - 2020. - P. 1-8. -DOI: 10.1080/07391102.2020.1777902

139. Маевский, П.Ф. Флора средней полосы европейской части России. 10-е издание / П.Ф. Маевский. - М.: Товарищество научных изданий КМК, 2006. - 640 с.

140. Лазарев, А.В. Род Geum в современных экологических условиях средней России / А.В. Лазарев, Т.В. Бурченко // Научные ведомости. - 2009. -Том 58, № 3. - С. 34-38.

141. Taylor, K. Geum Rivale L / K. Taylor // The Journal of Ecology. -1997. - Volume 85, Issue 5. - P. 721.

142. Hulten, E. The amphi-atlantic plants and their phytogeographical connections / E. Hulten // Kongliga Svenska Vetenskaps - Akademiens Handlingar. - 1958. - Volume 4, Issue 7 (1). - P. 1-340.

143. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Том 2. Семейства Actinidiaceae — Malvaceae, Euphorbiaceae — Haloragaceae / Отв. ред. А. Л. Буданцев. — СПб.: Издательство КМК, 2009. — 354 с.

144. Блинова К.Ф. Гравилаты как танидные растения / К.Ф. Блинова // Сборник научных трудов Ленинградского химико-фармацевтического института. - Ленинград: издательство Ленинградского химико-фармацевтического института, 1957. - С. 80-90.

145. Лазарев, А.В. Химический состав семян гравилата городского (Geum urbanum L.) в зависимости от условий произрастания / А.В. Лазарев, Т.В. Бурченко // Вестник КрасГАУ. - 2010. - №7. - С. 96-100.

146. Krupinska, A. 1970. Essential oils from Geum species in Poland / A. Krupinska // Annals of Pharmacotherapy. - Volume 8, Issue 4. - P. 93-102.

147. Vollmann, C. Composition of the root essential oils of several Geum species and related members of the subtribus Geinae (Rosaceae) / C. Vollmann, W. Scbultze // Flavour and Fragrance Journal. - 1995. - Volume 10. - P. 173-178.

148. Owczarek, A. Composition of essential oil from aerial and underground parts of Geum rivale and G. urbanum growing in Poland / A. Owczarek, J. Gudej, A. Kicel // Natural Product Communications. - 2013. -Volume 8, Issue 4. - P. 505-508.

149. Richter, R. Three sesquiterpene hydrocarbons from the roots of Panax ginseng C.A. Meyer (Araliaceae) / R. Richter, S. Basar, A. Koch, W.A. König // Phytochemistry. - 2005. - Volume 66, Issue 23. - P. 2708-2713. -D0I:10.1016/j.phytochem.2005.09.012

150. Орлова А.А. Химические компоненты Geum rivale L. и их биологическая активность / А.А. Орлова, М.Н. Повыдыш //Фармация и фармакология. - 2020. - Том 8, №2. - С. 133-146.

151. Panizzi, L. In vitro antimicrobial activity of extracts and isolated constituents of Geum rivale / L. Panizzi, S. Catalano, C. Miarelli, P.L. Cioni, E. Campeol // Phytotherapy Research. - 2000. - Volume 14. - P. 561-653.

152. Cheng, X.-R. Chemical constituents of plants from the genus Geum / X.-R. Cheng, H.-Z. Jin, J.-J. Qin, J.-J. Fu, W.-D. Zhang // Chemistry and biodiversity. - 2011. - Volume 8. - P. 203-222.

153. Hahlbrock, K. Physiology and Molecular Biology of Phenylpropanoid Metabolism / K. Hahlbrock, D. Scheel // Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology. - 1989. - Volume 40. - P. 347- 369.

154. Костюк, В.А. Растительные полифенольные соединения как компоненты функционального питания / В.А. Костюк // Труды БГУ. - 2016. -Том 11, Часть 1. - С. 32-41.

155. Морозова, Е.В. Содержание и состав фенолкарбоновых кислот в Geum rivale, G. urbanum и G. aleppicum (Rosaceae) / Е.В. Морозова, И.И. Чемесова, Г.П. Яковлев // Растительные ресурсы. - 2009. - Том 45, № 4. - С. 54-55.

156. Owczarek, A. Investigation into biological active constituents of Geum rivale L. / A. Owczarek, J. Gudej // Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug research. - 2013. - Volume 70, Issue 1. - P. 111-114.

157. Ming, D.-Sh. A new compound from Geum rivale L. / D.-Sh.Ming, R.-W. Jiang, P.P.-H. But, G.H.N. Towers, D.-Q. Yu // Journal of Asian Natural Products Research. - 2002. - Volume 4, Issue 3. - P. 217-220.

158. Polish Pharmacopoeia VI edition. - Warszawa: Polish Pharmaceutical Society, 2002. - 896 p.

159. Owczarek, А. Quantitative determination of ellagic acid and gallic acid in Geum rivale L. and G. urbanum L. / A. Owczarek, M.A. Olszewska, J. Gudej // Acta Biologica Cracoviensia Sertes Botanica. - 2014. - Volume 54, Issue 2. - P. 74-78.

160. Полухина, Т.С. Количественное определение флавоноидов в надземной части гравилата речного (Geum rivale L.) / Т.С. Полухина, С.Ф. Погудина, Д.Р. Инизарова // Современные научные исследования: Актуальные вопросы, достижения и инновации. Сборник статей победителей III Международной научно-практической конференции. - Пенза: МЦНС «Наука и просвещение», 2017. - С. 225-227.

161. Chen, X-X. Condensed tannins from Ficus virens as tyrosinase inhibitors: structure, inhibitory activity and molecular mechanism / X.-X. Chen, Y.

Shi, W.-M. Chai, H.-L. Feng, J.-X. Zhuang, Q.-X. Chen // PLoS ONE. - 2014. -Volume 9, Issue 3. - P.1-12. - DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0091809.

162. Moilanen, J. Characterization of bioactive plant ellagitannins by chromatographic, spectroscopic and mass spectrometric methods / J. Moilanen, J. Sinkkonen, J.-P. Salminen // Chemoecology. - 2013. - Volume 23. - P.165-179. -DOI: https://doi.org/10.1007/s00049-013-0132-3.

163. Moilanen, J. Distribution and content of ellagitannins in Finnish plant species / J. Moilanen, P. Koskinen, J.-P. Salminen // Phytochemistry. - 2015. -Volume 116. - P. 188-197. - DOI: 10.1016/j.phytochem.2015.03.002

164. Moilanen, J. Ecologically neglected tannins and their biologically relevant activity: chemical structures of plant ellagitannins reveal their in vitro oxidative activity at high pH / J. Moilanen, J.-P. Salminen // Chemoecology. -2008. - Volume 18. - P. 73 - 83.

165. Owczarek, A. Rare ellagic acid sulphate derivatives from the rhizome of Geum rivale L.—structure, cytotoxicity, and validated HPLC-PDA assay / A. Owczarek, M. Rozalski, U. Krajewska, M.A. Olszewska // Applied Science. -2017. - Volume 7, Article ID 400. - P. 1-13. - DOI: 10.3390/app7040400

166. Hulden, L. The first Finnish malariologist, Johan Haartman, and the discussion about malaria in 18th century Turku, Finland / L. Hulden // Malaria Journal. - 2011. - Volume 10, Issue 43. - P.1-7. - DOI:10.1186/1475-2875-10-43

167. Montvale, N.J. Physicians' desk reference for herbal medicines, 4th edition / N.J. Montvale. - Toronto: Thomson Reuters, 2007. - 990 p.

168. Egoshina, T.L. Medicinal plants in folk medicine of taiga zone of Russia: peculiarities of use and resources / T.L. Egoshina, E.A. Luginina // Plant, fungal and habitat diversity investigation and conservation. - Proceedings of IV BBC - Sofia, 20-26 June 2006. - P. 624-631. - DOI: 10.13140/2.1.4303.9044

169. Birnesser, H. The homeopathic antiarthritic preparation Zeel comp. N: Review of molecular and clinical data / H. Birnesser, P. Stolt // Explore. - 2007. -Volume 3, Issue 1. - P. 16-22.

170. Лановой, И.Д. Электрофизиологический анализ изменений функционального состояния матки под влиянием вытяжки из растений / И.Д. Лановой, В.М. Вакалюк, Н.М. Дрынь // Тезисы докладов 5-го съезда фармакологов УССР. - Запорожье, 1985. - С. 91.

171. Нешта, И.Д. 1989. Химическое и фармакологическое изучение растений сем. розоцветных / И.Д. Нешта, М.К. Чабанов // Новые лекарственные препараты из растений Сибири и Дальнего Востока. - Томск, 1989. - С. 122-123.

172. Lamaison, J.L. Tannin content and inhibiting activity of elastase in Rosaceae / J.L. Lamaison, A. Carnat, C. Petitjean-Freytet // Annales Pharmaceutiques Francaises. - 1990. - Volume 48, Issue 6. - P. 335-340.

173. Clark, A.M. Antimicrobial activity of phenolic constituents of Magnolia grandiflora L. / A.M. Clark, F.S. El-Feraly, W. S. Li // Journal of Pharmaceutical Science. - 1981. - Volume 70. - P. 951-952.

174. Лобанова, И.Е. Противовирусные свойства дикорастущих и культивируемых растений юго-западной Сибири / И.Е. Лобанова, Е.И. Филиппова, Г.И. Высочина, Н.А. Мазуркова // Растительный мир азиатской России. - 2016. - Том 22, № 2. - С. 64-72.

175. Levina, A.S. Knockdown of different influenza A virus subtypes in cell culture by a single antisense oligodeoxyribonucleotide / A.S. Levina, M.N. Repkova, N.A. Mazurkova, E.V. Makarevich, Z.R. Ismagilov, V.F. Zarytova // International Journal of Antimicrobial Agents. - 2015. - Volume 46, Issue 1. - P. 125-128.

176. Guyot, S. Direct thiolysis on crude apple materials for HPLC characterization and quantification of polyphenols in cider apple tissues and juices / S. Guyot, N. Marnet, P. Sanoner, J.F. Drilleau // Methods in Enzymology. -2001. - № 335. - P. 57-70.

177. Re, R. Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay / R. Re, N. Pellegrini, A. Proteggente, A. Pannala, M. Yang,

C. Rice-Evans // Free Radical Biology & Medicine. - 1999. - № 26. - P.1231-1237.

178. Yen, G.C. Antioxidant activity of various tea extracts in relation to their antimutagenicity / G.C. Yen, H.Y. Chen // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 1995. - № 43. - P. 27-32.

179. Oszmianski, J. Antioxidant tannins from Rosaceae plant roots / J. Oszmianski, A. Wojdylo, E. Lamer-Zarawska, K. Swiader // Food chemistry. -2007. - № 100. - P. 579-583.

180. Brand-Williams, W. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity / W. Brand-Williams, M.E. Cuvelier, C. Berset // LWT - Food Science and Technology. - 1995. - Volume 28, Issue 1. - P. 25-30. - DOI: 10.1016/S0023-6438(95)80008-5

181. Olszewska, M.A. Profiling of phenolic compounds and antioxidant activity of dry extracts from the selected Sorbus species / M.A. Olszewska, A. Presler, P. Michel // Molecules. - 2012. - Volume 17, Issue 3. - P. 3093-3113. -DOI: https://doi.org/10.3390/molecules17033093.

182. Pulido, R. Antioxidant activity of dietary polyphenols as determined by a modified ferric reducing/antioxidant power assay / R. Pulido, L. Bravo, F. Saura-Calixto // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2000. - Volume 48, Issue 8. - P. 3396-3402. - DOI: https://doi.org/10.1021/jf9913458

183. Olszewska, M.A. Antioxidant activity of inflorescences, leaves and fruits of three Sorbus species in relation to their polyphenolic composition / M.A. Olszewska, P. Michel // Natural Product Research. - 2009. - Volume 23, Issue 16. - P. 1507-1521. - DOI: https://doi.org/10.1080/14786410802636177

184. Azuma, K. Phenolic Antioxidants from the Leaves of Corchorus olitorius L. / K. Azuma, M. Nakayama, M. Koshioka, K. Ippoushi, Y. Yamaguchi, K. Kohata, Y. Yamauchi, H. Ito, H. Higashio // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 1999. - Volume 47, Issue 10. - P. 3963-3966. - DOI: 10.1021/jf990347p.

185. Owczarek A. Antioxidant activity of Geum rivale L. and Geum urbanum L. / A. Owczarek, J. Gudej, M.A. Olszewska // Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug research. - 2015. - Volume 72, Issue 6. - P. 1239-1244

186. Devi, B.P. Inflammation and Medicinal Plants - An Ethnomedicinal Approach / B.P. Devi, N. Talmilchevan, R. Ramasubramaniaraja // Journal of Phytology. - 2010. - Volume 2, Issue 2. - P. 49-56.

187. Tunon, H. Evaluation of anti-inflammatory activity of some Swedish medicinal plants. Inhibition of prostaglandin biosynthesis and PAF-induced exocytosis / H. Tunon, C. Olavsdotter, L. Bohlin // Journal of Ethnopharmacology. - 1995. - № 48. - P. 61-76.

188. Bilova, T. A Snapshot of the Plant Glycated Proteome / T. Bilova, E. Lukasheva, D. Brauch, U. Greifenhagen, G. Paudel, E. Tarakhovskaya, N. Frolova, J. Mittasch, G.U. Balcke, A. Tissier, . Osmolovskaya, T. Vogt, L.A. Wessjohann, C. Birkimeyer, C. Milcowski, Frolov, A. // Journal of Biological Chemistry. -2016. - Volume 291, Issue 14. - P. 7621-7636. - DOI: 10.1074/jbc.m115.678581

189. Davis, B. D. Identification of isomeric flavonoid glucuronides in urine and plasma by metal complexation and LC-ESI-MS/MS / B.D. Davis, P.W. Needs, P.A. Kroon, J.S. Brodbelt // Journal of Mass Spectrometry. - 2006. - Volume 41, Issue 7. - P. 911-920. - DOI:10.1002/jms.1050

190. Simirgiotis, M. Antioxidant capacities and analysis of phenolic compounds in three endemic Nolana species by HPLC-PDA-ESI-MS / M. Simirgiotis, J. Benites, C. Areche, B. Sepulveda // Molecules. - 2015. - Volume 20, Issue 6. - P. 11490-11507. - DOI:10.3390/molecules200611490

191. Mena, P. Rapid and comprehensive evaluation of (poly)phenolic compounds in pomegranate (Punica granatum L.) juice by UHPLC-MSn / P. Mena, L. Calani, C. Dall'Asta, G. Galaverna, C. Garcia-Viguera, R. Bruni, A. Crozier, D. Del Rio // Molecules. - 2012. - Volume 17, Issue 12. - P. 1482114840. - DOI: 10.3390/molecules171214821

192. Zhu, M. Phenolic profiling of Duchesnea indica combining macroporous resin chromatography (MRC) with HPLC-ESI-MS/MS and ESI-IT-

MS / M. Zhu, X. Dong, M. Guo // Molecules. - 2015. - Volume 20, Issue 12. - P. 22463-22475. - D01:10.3390/molecules201219859

193. Spínola, V. Evaluation of Rubus grandifolius L. (wild blackberries) activities targeting management of type-2 diabetes and obesity using in vitro models / V. Spínola, J. Pinto, E.J. Llorent-Martínez, H. Tomás, P.C. Castilho // Food and Chemical Toxicology. - 2019. - Volume 123. - P.443-452.

194. Singh, A. Profiling of gallic and ellagic acid derivatives in different plant parts of Terminalia arjuna by HPLC-ESI-QT0F-MS/MS / A. Singha, V. Bajpaia, S. Kumara, K.R. Sharmac, B. Kumara // Natural Product Communication. - 2016. - Volume 11, Issue 2. - P. 239-244.

195. Aguirre-Hernández, E. (2010). HPLC/MS analysis and anxiolytic-like effect of quercetin and kaempferol flavonoids from Tilia americana var. Mexicana / E. Aguirre-Hernández, M.E. González-Trujano, A.L. Martínez, J. Moreno, G. Kite, T. Terrazas, M. Soto-Hernández // Journal of Ethnopharmacology. - 2010. -Volume 127, Issue 1. - P. 91-97. - D0I:10.1016/j.jep.2009.09.044.

196. Stoupi, S. Procyanidin B2 catabolism by human fecal microflora: Partial characterization of 'dimeric' intermediates // S. Stoupi, G. Williamson, J.W. Drynan, D. Barron, M.N. Clifford / Archieve of Biochemistry and Biophysics. -2010. - Volume 501. - P.73-78.

197. Bystrom, L.M. Characterisation of phenolics by LC-UV/Vis, LC-MS/MS and sugars by GC in Melicoccus bijugatus Jacq. "Montgomery" fruits / L.M. Bystrom, B.A. Lewis, D.L. Brown, E. Rodriguez, R.L. 0bendorf // Food Chemistry. - 2008. - Volume 111, Issue 4. - P. 1017-1024. -D0I:10.1016/j.foodchem.2008.04.058

198. Francescato, L.N. Identification of phenolic compounds in Equisetum giganteum by LC-ESI-MS/MS and a new approach to total flavonoid quantification / L.N. Francescato, S.L. Debenedetti, T.G. Schwanz, V.L. Bassani, A.T. Henriques // Talanta. - 2013. - Volume 105. - P. 192-203. - D0I: 10.1016/j.talanta.2012.11.072

199. Pawlowska, A. M. Quali-quantitative analyses of flavonoids of Morus nigra L. and Morus alba L. (Moraceae) fruits / A.M. Pawlowska, W. Oleszek, A. Braca // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2008. - Volume 56, Issue 9. - P. 3377-3380. - DOI: 10.1021/jf703709r

200. Tsao, R. Chemistry and Biochemistry of Dietary Polyphenols / R. Tsao // Nutrients. - 2010. - Volume 2, Issue 12. - P. 1231-1246. -D0I:10.3390/nu2121231

201. Ossipov, V. Gallic acid and hydrolysable tannins are formed in birch leaves from an intermediate compound of the shikimate pathway / V. Ossipov, J.-P. Salminen, S. Ossipova, E. Haukioja, K. Pihlaja // Biochemical Systematics and Ecology. - 2003. - Volume 31, Issue 1. - P. 3-16. - DOI:10.1016/s0305-1978(02)00081-9

202. Tsao, R. Chemistry of Flavonoids / R. Tsao, J. McCallum / L.A. de la Rosa, E. Alvarez-Parrilla, G. Gonzalez-Aguilar // Fruit and Vegetable Phytochemicals: Chemistry, Nutritional Value and Stability. - Iowa: Blackwell Publishing, 2009. - 357 P. - DOI: 10.1002/9780813809397.ch5

203. Cuong, D. Identification and characterization of phenylpropanoid biosynthetic genes and their accumulation in bitter melon (Momordica charantia) / D. Cuong, S.-J. Kwon, J. Jeon, Y. Park, J. Park, S. Park // Molecules. - 2018. -Volume 23, Issue 2. - P. 469. - DOI: 10.3390/molecules23020469

204. Orlova, A. Two new flavonol-bis-3,7-glucuronides from Geum rivale L. / A. Orlova, A. Whaley, A. Ponkratova, O. Balabas, S. Smirnov, M. Povydysh // Phytochemistry Letters. - 2021. - Volume 42. - P. 41-44.

ПРИЛОЖЕНИЕ А Акты о внедрении результатов диссертационной работы

УТВЕРЖДАЮ Ректор ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России, л.фар:ДО1., орофессор

7

И.А. Маркович

2021

Комиссия в составс: Председателя

и членов КОМИССИИ

Ю.1 . Ильиновой Д.С. Грнцоненко И.А. Титовнч

Акт внедрения peiy.ibiaroe научно-ирактической работы и учебный процесс

проректора но учебной работе, канл. фармацевт, наук, начальника учебно-

мегодичсского отдела директора департамента науки и подготовки научно-

педагогических кадров, канд. биол. на\к

назначенная приказом ФГВОУ ВО СПХФУ Минздрава России от «12» Mapia 2021 г. N? 100. составила акт о нижеследующем.

Результаты диссертационного исследования Орловой Анастасии Андреевны на 1ему «Фотохимическое изучение надземной части гравилата речного (Geum rivale I..)». представленного на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук, а именно: подходы к метаболомному анализу первичных метаболитов и использовании! результатов мсгаболомиого анализа для изучения биосинтетических путей вторичных метаболитов внедрены в учебный процесс по учебной дисциплине «Фармакогнозия» в рамках программы высшего образования — программы снециалитета по направлению подготовки 33.05.01 Фармация очной формы обучения, по учебной дисциплине «Основы фитохимии» в рамках программы высшего образования - программы бакалавриата по направлению подготовки 04.03.01 Химия очной формы обучения.

Председатель

члены комиссии

проректор по учебной работе, канд. фармацевт, наук, начальник учебно-методического отдела

директор департамента науки и подготовки научно-

педагогнческих кадров, канд. биол. наук

Ю.Г. Ильинова

Д.С. 1 рицаненко

И.А. Титович